[发明专利]一种毛竹叶中四种黄酮碳苷提取和纯化工艺

摘要

本发明公开了一种毛竹叶中四种黄酮碳苷提取和纯化工艺，采用热回流提取工艺对毛竹叶有效成分进行提取，通过单因素试验和正交试验，得出四种黄酮碳苷的最佳提取工艺为：75％乙醇、料液比1∶20、70℃下提取2h，重复提取4次。然后通过大孔树脂对上述黄酮粗提液进行纯化，通过静态饱和吸附量与解吸量的比较，得出D101大孔树脂为最佳选择。再采用聚酰胺树脂对上述组分继续纯化，通过三种常用的聚酰胺树脂的动态吸附筛选结果比较，最后选择聚酰胺树脂的粒径为0.15～0.25mm，40％乙醇溶液对四种黄酮碳苷进行纯化。经过上述处理，最终四种黄酮碳苷在竹叶黄酮粉末中的纯度达76.939mg·g^-1。

主权项

毛竹叶中四种黄酮碳苷提取和纯化工艺，所述的四种黄酮碳苷为荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷，其特征在于，包括如下步骤：(1)准确称取毛竹叶粉末，加入乙醇水溶液中进行热回流提取，重复提取4次，过滤并将滤液合并得提取液；所述热回流提取的工艺为：70％～80％的乙醇，料液比为1∶15～1∶25，60～80℃恒温水浴提取1～3h；(2)采用减压蒸馏法除去提取液中的有机溶剂，加入与提取液等体积的石油醚萃取，除去色素和脂溶性成分，重复萃取三次，得到毛竹叶黄酮粗提物，石油醚回收，循环使用；(3)将毛竹叶黄酮粗提物经大孔树脂进行纯化处理：大孔树脂进行预处理，将毛竹叶黄酮粗提物上大孔树脂柱，湿法装柱，加入10mg·mL^‑1竹叶黄酮粗提液，控制流速3BV·h^‑1，大孔树脂与样品上样量比为5∶1，收集样品流出液，流出液重复上柱3次后，用15％乙醇溶液以4BV·h^‑1的流速初步洗脱除杂，浓缩洗脱液，然后用60％的乙醇溶液以4BV·h^‑1流速洗脱，最后收集60％乙醇洗脱液，浓缩并冷冻干燥得纯化后毛竹叶黄酮干粉；(4)经聚酰胺树脂再次进行纯化处理：将上述大孔树脂纯化后的竹叶黄酮粉末，溶解后，将聚酰胺树脂湿法装柱于2cm×35cm层析柱中，装柱高度为12.5cm，加入10mg·mL^‑1上述竹叶黄酮干粉配制的溶液，控制3BV·h^‑1流速过柱，收集流出液，重复上柱3次，再用蒸馏水洗脱，收集洗脱液，浓缩，接着用等体积40％乙醇溶液洗脱，最后收集40％乙醇洗脱液，浓缩并冷冻干燥得纯化后的竹叶黄酮干粉。