[发明专利]基于滚环扩增技术的检测左旋色氨酸的方法在审
申请号: | 201410789100.7 | 申请日: | 2014-12-17 |
公开(公告)号: | CN104450926A | 公开(公告)日: | 2015-03-25 |
发明(设计)人: | 赵国杰;关一夫 | 申请(专利权)人: | 中国医科大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 沈阳智龙专利事务所(普通合伙) 21115 | 代理人: | 宋铁军 |
地址: | 110122 辽宁省沈阳市沈阳*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明涉及一种基于滚环扩增(rollingcircleamplification,RCA)技术的检测左旋色氨酸(L-Trp)的方法。该方法中,左旋色氨酸结合于色氨酸阻遏蛋白(trprepressor,trpR),导致trpR发生构象变化,并能够特异性地结合在DNA双链的识别序列上,从而抑制RCA的发生。通过检测RCA的扩增效率,进而计算出L-Trp的浓度。该方法为检测L-Trp提供了快速、简便、定量的测量技术,具有重要的科学价值和广阔的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 基于 扩增 技术 检测 色氨酸 方法 | ||
【主权项】:
一种基于滚环扩增技术的检测左旋色氨酸的方法,其特征在于包括下述步骤:待检测的左旋色氨酸与色氨酸阻遏蛋白结合,结合了左旋色氨酸的色氨酸阻遏蛋白通过识别并结合由环形单链模板DNA与线性单链引物DNA形成的双链上的特异性识别序列,进而抑制DNA聚合酶对单链引物DNA的延伸和扩增,滚环扩增反应的抑制程度与左旋色氨酸的浓度成正比,通过制备左旋色氨酸浓度与滚环扩增抑制率的标准曲线,检测待测样品对滚环扩增的抑制率,从而确定出待测样品中的左旋色氨酸含量。
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