[发明专利]G6PD过表达型ACHN稳转细胞株及其构建方法在审
申请号: | 201410797658.X | 申请日: | 2014-12-19 |
公开(公告)号: | CN104531622A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 朱月春;张巧;王艳玲;况应敏;狄勇;李玉倩;杨惠鑫 | 申请(专利权)人: | 昆明医科大学 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/53 |
代理公司: | 云南派特律师事务所 53110 | 代理人: | 张怡 |
地址: | 650000 云南省昆明*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明涉及医学分子生物学相关技术,尤其是采用siRNA干扰技术构建细胞研究模型。本发明所述的G6PD过表达型ACHN稳转细胞株是一种G6PD过表达型ACHN稳转细胞株,是将pBABE-puro-G6PD转染人肾细胞腺癌细胞株ACHN,经嘌呤霉素加压筛选,Real-time PCR、Western blot验证,以及反复传代、冻存复苏所得的G6PD表达量稳定增加40倍以上的细胞株。其构建方法包括以下步骤:一、G6PD基因的克隆;二、pBABE-puro-G6PD重组表达载体的构建;三、ACHN细胞株的转染;四、ACHN-G6PD稳定细胞株的筛选及鉴定。这一稳定细胞株的建立,为探究G6PD与肾细胞癌的相关性及其机制研究提供细胞模型,也为揭示肾细胞癌的发生发展机理,发现新的药物作用靶点奠定研究基础。 | ||
搜索关键词: | g6pd 表达 achn 细胞株 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种G6PD过表达型ACHN稳转细胞株,其特征在于是一种G6PD过表达型ACHN稳转细胞株,是将pBABE‑puro‑G6PD转染人肾细胞腺癌细胞株ACHN,经嘌呤霉素加压筛选,Real‑time PCR、Western blot验证,以及反复传代、冻存复苏所得的G6PD表达量稳定增加40倍以上的细胞株。
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