[发明专利]一种生地脱毒组培快繁的方法

摘要

本发明公开了一种生地脱毒组培快繁的方法，属于植物脱毒组培快繁技术领域。本发明是以大黄种根小段为材料，将斜截面用0.01％α‑萘乙酸钠喷淋，再将种根小段置于5～15℃的条件下，采用紫外线消毒处理，然后浸泡于30～35℃的75％酒精溶液中，浸泡时间为3～5min，然后用无菌水冲洗掉酒精溶液，通过诱导培养、增殖培养、生根培养后，形成3～5cm的生根组培苗生、0.3～0.7cm的生根珠芽，直径0.5～1.0cm生根小块根，移栽基质培养至成苗。与现有大黄种根小段繁殖方法相比，本发明的优点是降低污染率，提高组培苗品质，进而提高药材品质。

主权项

一种生地脱毒组培快繁的方法，其特征在于：按如下步骤进行：1)培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：①基本培养基：选用MS培养基，蔗糖或白糖30～40g/L，琼脂10～15g/L，木屑3～5g/L，沙壤土10～15g/L，pH6.5～7.2；②诱导培养基：MS中添加6‑BA0.8～1.5mg/L、NAA0.15～0.5mg/L、小球藻粉2～3g/L，75％酒精0.01～0.02mg/L；③愈伤组织分化培养基：MS中添加6‑BA2.5～3.0mg/L和NAA0.2～0.3mg/L；④增殖培养基：MS中添加6‑BAl.0mg/L和NAAO.5mg/L；⑤生根培养基：1/2MS中添加IBA0.12mg/L；2)外植体的选取与灭菌：取生地的种根，将其截成3～5cm的小段，经灭菌处理，作为脱毒组培用的外植体；3)诱导培养：将步骤2)灭菌处理后的种根小段接种在诱导培养基上，培养形成愈伤组织，再将愈伤组织移植至分化培养基诱导出丛芽，形成无根组培苗、珠芽和小块根；4)增殖培养：将步骤3)形成的无根组培苗、珠芽和小块根接种在增殖培养基上，诱导出丛芽，形成无根组培苗、珠芽和小块根；5)生根培养：将步骤4)增殖形成的无根组培苗、珠芽和小块根接种在生根培养基中进行生根培养；6)移栽：当步骤5)的生根组培苗生长至3～5cm、生根珠芽0.3～0.7cm，生根小块根直径0.5～1.0cm，移栽基质培养至成苗。