[发明专利]一种三元复合体系检测探针的构建方法

摘要

本发明一种三元复合体系检测探针的构建方法，属于生物传感领域。利用建立的方法设计出能够对待测分子，如赭曲霉毒素A进行灵敏检测的检测探针。特点在于利用核酸碱基互配和核酸链连续互补原理，对检测信号放大，属于生物传感领域。首先用待测分子与核酸链H₁作用后，引发其构型改变，使其能与核酸链H₂的碱基互补配对，使H₂构型改变，改变后的H₂又能与H₁的碱基互补配对，实现单一检测分子引发核酸链式反应的目的。最后，在氯化血红素存在时，H₂上的过氧化物酶模拟序列能够催化过氧化氢氧化四甲基联苯胺，在盐酸溶液存在时产生有色溶液。根据溶液在一定波长处吸光度与待测分子浓度之间的关系，可以得到其检测曲线。

主权项

一种构建三元复合体系检测探针的方法，三元复合体系包含适配体，过氧化物酶模拟片段和核酸链式反应单元；该方法能实现操作简单、灵敏快速，无需使用信号分子标记，对检测信号多级放大的目的，并对小分子，如赭曲霉毒素A进行灵敏检测；其特征是：待测分子首先与核酸链H₁反应，使H₁的空间结构改变，由首尾相连的“发夹”结构变为直链结构，再加入核酸链H₂，由于直链结构的H₁序列中含有能与核酸链H₂反应的碱基序列，碱基互补配对后使核酸链H₂空间结构由“发夹”结构变为直链结构，能够再与核酸链H₁反应，经循环反应后，形成长链的H₁‑H₂互补双链DNA结构；再加入含过氧化氢的四甲基联苯胺溶液进行显色，由于每个核酸链H₂包含过氧化物酶模拟片段，在氯化血红素存在时，能够催化过氧化氢氧化四甲基联苯胺，产生有色物质，根据溶液吸光度与待测分子浓度间关系，可以得到其检测曲线。