[发明专利]用于从蛋白制剂去除内毒素的材料和方法有效

专利信息
申请号: 201480009553.1 申请日: 2014-02-20
公开(公告)号: CN105121457B 公开(公告)日: 2019-04-30
发明(设计)人: 彼得·斯坦利·加尼翁;文森特·瓦根尼德 申请(专利权)人: 新加坡科技研究局
主分类号: C07K1/14 分类号: C07K1/14;C07K1/16;C07K1/18;C07K1/36;B01D15/36;B01D15/08;B01D15/34
代理公司: 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 代理人: 武晨燕;迟姗
地址: 新加坡*** 国省代码: 新加坡;SG
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摘要: 一种方法包括:(i)将尿囊素以过饱和量添加至蛋白制剂中,所述蛋白制剂包含所需蛋白和作为污染物的至少一种内毒素,(ii)在所述添加步骤后去除固体以提供样品用于通过柱中正电性粒子的填充粒子床上的空隙排阻色谱进一步纯化,所述填充粒子床具有粒子间体积,(iii)将样品体积施加到所述填充粒子床,其中所述正电性粒子支持空隙排阻色谱,并且其中所述样品体积不大于所述粒子间体积,和(iv)洗脱包含所需蛋白和减少量的内毒素的经纯化样品。所述方法任选地仅利用尿囊素处理或仅利用空隙排阻色谱进行。
搜索关键词: 用于 蛋白 制剂 去除 内毒素 材料 方法
【主权项】:
1.一种方法,包括:(i)将过饱和量的尿囊素添加至蛋白制剂中,所述蛋白制剂包含所需蛋白和作为污染物的至少一种内毒素,其中所述所需蛋白是抗体;(ii)在步骤(i)后去除固体以提供样品用于进一步纯化;(iii)提供包括填充在柱中的正电性粒子的填充粒子床,所述填充粒子床具有粒子间体积;(iv)用被选择用于防止所述所需蛋白与所述柱中的正电性粒子结合的缓冲液平衡所述填充粒子床,其中所述缓冲液具有6‑8的范围的pH,并且所述缓冲液具有0mM‑150mM的范围的氯化钠浓度;(v)将样品体积施加到所述填充粒子床,其中所述正电性粒子支持空隙排阻色谱,并且其中所述样品体积不大于所述粒子间体积;和(vi)洗脱包含所述所需蛋白和减少量的所述内毒素的经纯化样品,其中洗脱的所述所需蛋白驻留在平衡所述柱的缓冲液中。
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