[发明专利]信使RNA加帽效率的定量评估在审

专利信息
申请号: 201480013628.3 申请日: 2014-03-14
公开(公告)号: CN105051213A 公开(公告)日: 2015-11-11
发明(设计)人: M·哈特莱因;F·德罗莎;A·迪亚斯 申请(专利权)人: 夏尔人类遗传性治疗公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/113
代理公司: 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 代理人: 邬玥;葛强
地址: 美国马*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 发明尤其提供了定量mRNA加帽效率的方法,特别是体外合成的mRNA。在一些实施方案中,所述方法包括定量加帽效率和帽的甲基化状态的色谱方法。
搜索关键词: 信使 rna 效率 定量 评估
【主权项】:
一种定量mRNA加帽效率的方法,所述方法包括:(1)提供包含加帽mRNA和未加帽mRNA的mRNA样品;(2)在允许与邻近加帽或未加帽的mRNA的倒数第二个碱基的所述mRNA的5'未翻译区中的序列互补的DNA寡核苷酸与所述序列复性的条件下使所述mRNA样品与所述DNA寡核苷酸接触;(3)提供选择性降解DNA/RNA杂合体和/或未复性mRNA的一种或多种核酸酶,得到加帽片段和未加帽片段;(4)通过色谱分离所述加帽片段和未加帽片段;和(5)测定所述加帽片段和未加帽片段的相对量,从而定量mRNA加帽效率。
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