[发明专利]醋酸去氨加压素的固相制备工艺

摘要

本发明一种醋酸去氨加压素的固相制备工艺，包括以下步骤：以替代度为1.6~2.0mmol/g的Am Resin树脂，溶胀、抽干为起始原料，偶联Fmoc Rink Amide AM-Linker；根据肽序，从C端到N端开始再依次偶联，直至完成线肽树脂的合成；在线肽树脂中加入I₂溶液，从而将线性肽树脂氧化成氧化型肽树脂，I₂溶液为将I₂溶解于由DMF、MeOH按照1：1体积比形成的溶剂中；将氧化型肽树脂缓缓加入裂解液中，待全部加完后，再在室温裂解2h，待裂解时间结束后，将树脂滤掉得到含多肽的裂解液；将含多肽的裂解液缓缓加入到的冰乙醚中，析出白色的固体粗肽，从而得到干燥后的粗肽。本发明产品纯度可达到99%以上，总收率可超过45%，生产效率较高，对设备要求低，并且可以实现规模化生产，有较好的经济社会价值和广泛的应用前景。

主权项

 一种醋酸去氨加压素的固相制备工艺，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、以替代度为1.6~2.0mmol/g的Am Resin树脂，溶胀、抽干为起始原料，偶联Fmoc Rink Amide AM‑Linker，制得功能基载体；步骤二、采用固相多肽逐步缩合法，根据肽序从C端至N端，首先将Fmoc‑Gly‑OH与步骤一Rink Amide‑AM Resin偶联反应获得Fmoc‑Gly‑功能基载体；步骤三、去除步骤二Fmoc‑Gly‑功能基载体的保护基Fmoc，从而获得H ‑Gly‑功能基载体；步骤四、根据肽序，按照Fmoc/tBu固相逐步合成策略，重复以上脱Fmoc保护和偶联操作步骤，从C端到N端开始再依次偶联Fmoc‑D‑Arg(pbf) ‑OH、 Fmoc‑Pro‑OH、 Fmoc‑Cys(Trt) ‑OH、 Fmoc‑Asn(Trt) ‑OH、 Fmoc‑Gln(Trt) ‑OH、 Fmoc‑Phe‑OH、 Fmoc‑Tyr(tBu) ‑OH、Mpr(Trt) ‑OH，期间依次脱去Fmoc‑保护基团，直至完成线肽树脂的合成；步骤五、在所述线肽树脂中加入I₂溶液，从而将线性肽树脂氧化成氧化型肽树脂，所述I₂溶液为将I₂溶解于由DMF、MeOH按照1：1体积比形成的溶剂中，所述I₂的量为线肽树脂的摩尔数的4~8倍；步骤六、将所述氧化型肽树脂缓缓加入裂解液中，待全部加完后，再在室温裂解2h，待裂解时间结束后，将树脂滤掉得到含多肽的裂解液，所述裂解液由TFA、TIS、H₂O按照95：2~3：2~3体积份比例混合形成；步骤七、将含多肽的裂解液缓缓加入到的冰乙醚中，析出白色的固体粗肽，静置后离心，并用冰的无水乙醚交替研磨洗涤、离心，所述粗品经真空干燥至恒重，得到干燥后的粗肽；步骤八、将所述干燥后的粗肽采用乙腈：纯水=2：8的溶液溶解，借助制备型反相HPLC 纯化，收集目的产物，旋蒸，冻干得到醋酸去氨加压素成品。