[发明专利]一种用于MALDI‑TOFMS检测的植物线虫前处理方法有效
申请号: | 201510012165.5 | 申请日: | 2015-01-09 |
公开(公告)号: | CN104596816B | 公开(公告)日: | 2017-10-10 |
发明(设计)人: | 龙海;李芳荣;李一农;凌杏园;冯建军;郑耘;谢泳桂;刘亮山 | 申请(专利权)人: | 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N27/64 |
代理公司: | 深圳新创友知识产权代理有限公司44223 | 代理人: | 刘莉 |
地址: | 518000 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于MALDI‑TOF MS检测的植物线虫前处理方法,包括如下步骤(1)在灭菌的载片上滴加提取液,所述提取液的滴加量为每条所述植物线虫滴加5‑8μl;(2)在体视显微镜下将清洗好的所述植物线虫转移到所述载片上的提取液中,并压破所述植物线虫,所述提取液用于提取所述植物线虫的蛋白质并将所述蛋白质水解为多肽;(3)在体视显微镜下,用移液枪吸取步骤(2)中的提取液并连带压破的植物线虫一起滴加在样品板上,并晾干;(4)在晾干后的样品板上加基质溶液,使所述多肽分散在所述基质溶液中,并晾干得到用于MALDI‑TOF MS检测的样品,每条所述植物线虫加1‑1.5μl的所述基质溶液。本发明的方法易于操作、结果重复性好、背景信号低且灵敏度高。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 maldi tof ms 检测 植物 线虫 处理 方法 | ||
【主权项】:
一种用于MALDI‑TOF MS检测的植物线虫前处理方法,其特征在于,所述植物线虫前处理方法是针对单条植物线虫进行的处理,包括如下步骤:(1)在灭菌的载玻片上滴加5‑8μl的提取液;(2)在体视显微镜下将清洗好的所述单条植物线虫转移到所述载玻片上的提取液中,并压破所述单条植物线虫,所述提取液用于提取所述单条植物线虫的蛋白质并将所述蛋白质水解为多肽;(3)在体视显微镜下,用移液枪吸取步骤(2)中的提取液并连带压破的植物线虫一起滴加在样品板上,并晾干;(4)在晾干后的样品板上加1‑1.5μl的基质溶液,使所述多肽分散在所述基质溶液中,并晾干得到用于MALDI‑TOF MS检测的样品。
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