[发明专利]一种用于检测人冠状病毒感染的通用引物序列及检测方法在审
申请号: | 201510012641.3 | 申请日: | 2015-01-09 |
公开(公告)号: | CN104498636A | 公开(公告)日: | 2015-04-08 |
发明(设计)人: | 耿合员;汪圣强;谢晓谦;肖雨;张汀;李宗;谭文杰;苏川 | 申请(专利权)人: | 江苏国际旅行卫生保健中心无锡分中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙)32260 | 代理人: | 张欢勇 |
地址: | 214101江苏省无锡市锡*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明通过对GenBank上登录的六种人冠状病毒全基因组核酸序列的比对分析,在基因组多聚酶基因编码区(1b区)设计了一对简并引物hCoV-For和hCoV-Rev用于对人冠状病毒的通用定性检测。上游引物序列hCoV-For:ATGGGWTGGGAYTAYCCHAARTGTG,下游引物序列hCoV-Rev:TGYTGKGARCARAAYTCRTGWGG,扩增目的片段大小为605bp。分别提取HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63和HCoV-HKU1阳性样本的RNA,通过One-step RT-PCR对该通用引物对进行验证。结果表明,分别以上述四种人冠状病毒RNA为模板,以hCoV-For和hCoV-Rev为通用引物进行One-step RT-PCR反应后都能扩增出大小约600bp的单一目的条带。对PCR产物进行测序验证,结果表明扩增序列正确且不存在交叉反应。本发明可用于对人冠状病毒感染的核酸快速定性检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 冠状 病毒感染 通用 引物 序列 方法 | ||
【主权项】:
一种用于检测人冠状病毒感染的通用引物序列,其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
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