[发明专利]采用Taqman探针法鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn)的方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201510018516.3 | 申请日： | 2015-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN104774920A | 公开（公告）日： | 2015-07-15 |
| 发明（设计）人： | 高利;陈万权;蔚慧欣;刘太国;刘博 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 吴泳历 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明“采用Taqman探针法鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn)的方法及试剂盒”，涉及植物病害检测技术。包括如下步骤：(1)获得TCK阳性质粒标准品的实时定量标准曲线，其中Ct值为纵坐标，起始模板拷贝数为横坐标；(2)提取待测样品的DNA；(3)以所述待测样品的DNA为模板进行实时荧光定量PCR反应，(4)根据所述实时荧光定量PCR反应获得的Ct值以及所述实时定量标准曲线得到所述待测样品中TCK的拷贝数；其特征在于：所述实时荧光定量PCR反应采用的引物如下：上游引物ACGACCGACTTTCCGAGAGC下游引物GTGTGGGACGAAGGCATCAA；Taqman探针FAM 5'-ACGACTTGCGGTCCCTCCACA-3'TAMAR，还提供了基于该方法的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 采用 taqman 探针 鉴定 小麦 黑穗菌 tilletia controversa hn 方法 | ||
【主权项】：
用于鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn)的Taqman探针法，包括如下步骤：(1)获得TCK阳性质粒标准品的实时定量标准曲线，其中Ct值为纵坐标，起始模板拷贝数为横坐标；(2)提取待测样品的DNA；(3)以所述待测样品的DNA为模板进行实时定量PCR反应，(4)根据所述实时定量PCR反应获得的Ct值以及所述实时定量标准曲线得到所述待测样品中TCK的拷贝数；其特征在于：所述实时定量PCR反应采用的引物及探针如下：上游引物ACGACCGACTTTCCGAGAGC，下游引物GTGTGGGACGAAGGCATCAA；Taqman探针FAM 5'‑ACGACTTGCGGTCCCTCCACA‑3'TAMAR。
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