[发明专利]高效筛选DNA断链损伤保护性药物的方法有效
申请号: | 201510021288.5 | 申请日: | 2015-01-15 |
公开(公告)号: | CN104535762A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 陈红君;余自成;曹志娟;卢建忠 | 申请(专利权)人: | 上海市杨浦区中心医院 |
主分类号: | G01N33/551 | 分类号: | G01N33/551 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人: | 王洁 |
地址: | 200090 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种高效筛选DNA断链损伤保护性药物的方法,其特征在于,包括以下步骤:将一端用荧光素FAM修饰另一端用氨基修饰的DNA通过共价键与磁性微球表面固定,得到固定化DNA;向固定化DNA中加入药物的溶液,得到具有药物的DNA;将具有药物的DNA进行体外染毒,得到染毒DNA;将染毒DNA进行磁性分离,分离掉染毒成分和反应杂质,保留未断链DNA;向未断链DNA中加入酶标FAM抗体,酶标FAM抗体与未断链DNA自由端的FAM发生免疫反应,得到免疫反应后的DNA;向免疫反应后的DNA中加入发光底物后,采用高灵敏度化学发光法检测免疫反应后的DNA,得到检测信号;将检测信号与对照组信号进行对比,判断药物是否保护DNA。采用本发明方法可以降低假阳性出现,十分具有实用价值。 | ||
搜索关键词: | 高效 筛选 dna 损伤 保护性 药物 方法 | ||
【主权项】:
一种高效筛选DNA断链损伤保护性药物的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤(1):将一端用荧光素FAM修饰另一端用氨基修饰的DNA通过共价键与磁性微球表面固定,得到固定化DNA;步骤(2):向所述的固定化DNA中加入药物的溶液,得到具有药物的DNA;步骤(3):将所述的具有药物的DNA进行体外染毒,得到染毒DNA;步骤(4):将所述的染毒DNA进行磁性分离,分离掉染毒成分和反应杂质,保留未断链DNA;步骤(5):向所述的未断链DNA中加入酶标FAM抗体,所述的酶标FAM抗体与未断链DNA自由端的FAM发生免疫反应,得到免疫反应后的DNA;步骤(6):向所述的免疫反应后的DNA中加入发光底物后,采用高灵敏度化学发光法检测所述的免疫反应后的DNA,得到检测信号;步骤(7):将所述的检测信号与对照组信号进行对比,判断所述的药物是否保护DNA。
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