[发明专利]用于检测肿瘤标志物MUC1的电化学发光适配体传感器的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了用于检测肿瘤标志物MUC1的电化学发光适配体传感器的制备方法及其应用，特点是包括磁性氧化石墨烯合成步骤；将电化学发光体和适配体同时标记到磁性氧化石墨烯材料表面形成多功能化氧化石墨烯材料的步骤；最后取5～10μL多功能化氧化石墨烯材料溶液滴涂于磁性玻碳电极表面得到用于检测肿瘤标志物MUC1的电化学发光适配体传感器的步骤；利用该电化学发光适配体传感器并根据电化学发光强度值与肿瘤标志物MUC1溶液浓度之间的定量关系可确定待测样品中肿瘤标志物MUC1的浓度，优点是检测方法简单、快速，检测结果灵敏、准确、特异性高。

主权项

一种用于检测肿瘤标志物MUC1的电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）多功能氧化石墨烯材料的合成a. 磁性氧化石墨烯的合成：在洁净的三颈烧瓶中加入30～50 mL 1 mg/mL的氧化石墨烯，超声1 h；然后在氮气氛保护下加入20～30 mL 0.05～0.07 mol/L的氯化亚铁溶液和20～30 mL 0.10～0.15 mol/L的氯化高铁溶液，于70～90℃搅拌回流，同时缓慢滴加10～15 mL 20%～30%的氨水至溶液的pH = 10～11，回流处理3～5 h；冷却后，用二次水洗涤至溶液的pH = 7，定容到50 mL，即得磁性氧化石墨烯材料溶液，4 ℃储存备用；b. 取步骤（a）中所得的磁性氧化石墨烯材料溶液200 μL于玻璃瓶中，超声1 h，然后加入200～400 μL偶联试剂，混合均匀，同时滴加稀盐酸溶液至溶液pH = 4～6，振荡孵育1 h，二次水洗涤3次；再加入30～50 μL 0.001～0.1 mol/L的电化学发光体溶液和30～50 μL 10～20 μmol/L的适配体溶液，混合均匀，然后滴加氢氧化钠溶液至溶液pH = 8～10，振荡孵育4 h，二次水洗涤3次后；加入质量百分浓度为1～2%的牛血清白蛋白溶液100～200 μL，4℃下浸泡1 h，二次水洗涤3次，定容至200 μL，即可得到适配体和电化学发光体同时标记的多功能化氧化石墨烯材料溶液，4 ℃下储存备用；（2）电化学发光适配体传感器的组装将直径为3～5 mm的磁性玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm和0.05 μm的三氧化二铝浆抛光打磨，然后在乙醇和二次水中分别超声2 min，氮气吹干；取5～10 μL步骤（1）中制备的多功能化氧化石墨烯材料溶液，滴涂到上述预处理过的磁性玻碳电极表面，多功能化氧化石墨烯材料即被均匀、牢固地吸附到电极表面，即得电化学发光适配体传感器。