[发明专利]一种鼠妇纤溶酶及其应用有效
| 申请号： | 201510043911.7 | 申请日： | 2015-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN104560924B | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 李博;吴勉华;郭立玮;田周 | 申请（专利权）人： | 南京中医药大学 |
| 主分类号： | C12N9/68 | 分类号： | C12N9/68;A61K38/48;A61P7/02 |
| 代理公司： | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 袁静 |
| 地址： | 210029 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种鼠妇纤溶酶及其应用，涉及制药领域。所述鼠妇纤溶酶，具有溶栓和抗凝活性，采用如下方法制备：（1）将鼠妇采用湿法超微粉碎，获得提取液；（2）从所述提取液中提取分子量为4kDa~100kDa的蛋白组分；（3）对步骤（2）所述分子量为4kDa~100kDa的蛋白组分采用硫酸铵沉淀法进行纯化，获得粗蛋白；（4）将所述粗蛋白经凝胶过滤层析和阴离子交换层析，取具有溶栓活性的洗脱液，得到鼠妇纤溶酶。本发明首次发现了鼠妇纤溶酶PSLTro01，同时具有较强的溶栓和抗凝的活性，溶栓作用相对温和，可以用于制备治疗血栓性疾病药物。 | ||
| 搜索关键词： | 鼠妇 纤溶酶 溶栓 粗蛋白 提取液 蛋白 阴离子交换层析 硫酸铵沉淀法 凝胶过滤层析 制备治疗血栓 超微粉碎 抗凝活性 溶栓活性 洗脱液 性疾病 抗凝 湿法 制药 制备 应用 发现 | ||
【主权项】：
1.一种鼠妇纤溶酶，其特征在于所述鼠妇纤溶酶具有溶栓和抗凝活性，分子量为37.5‑38.5KDa，且自N端起第1‑15位氨基酸残基的序列为：Asp – Ile – Asn – Gly – Gly – Gly – Ala – Thr – Leu – Pro – Gln – Pro – Leu – Tyr – Gln；所述鼠妇纤溶酶采用如下方法制备：（1）将鼠妇采用湿法超微粉碎，获得提取液；（2）从所述提取液中提取分子量为4kDa~100kDa的蛋白组分；（3）对步骤（2）所述分子量为4kDa~100kDa的蛋白组分采用硫酸铵沉淀法进行纯化，获得粗蛋白；（4）将所述粗蛋白经凝胶过滤层析和阴离子交换层析，取具有溶栓活性的洗脱液，得到鼠妇纤溶酶；步骤（4）的具体方法为：所述粗蛋白依次经过Sephadex G‑100凝胶过滤柱、Sephacryl S‑200 HR凝胶过滤柱、HiTrap Capto Q离子交换层析柱和Superose‑12凝胶过滤柱，取具有溶栓活性的洗脱液，得到鼠妇纤溶酶。
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