[发明专利]一种提高鸭黄病毒病毒滴度的培养方法

摘要

本发明公开了一种提高鸭黄病毒病毒滴度的培养方法，属于微生物病毒技术领域，主要包括以下步骤配制DMEM培养液、加入胎牛血清后接种细胞进行单层培养、加入亲和剂及DMEM培养液后继续培养1min～30min、接种鸭黄病毒2～5天，即可收获具有较高病毒滴度的鸭黄病毒液。本发明所述的培养方法主要通过改变鸭黄病毒与细胞间的微环境，增加病毒与细胞接触亲和度，从而大大提高鸭黄病毒病毒滴度。

主权项

一种提高鸭黄病毒病毒滴度的培养方法，其特征在于：其包括以下步骤：A、DMEM培养液的配制：将DMEM干粉溶于去离子水中，搅拌至完全溶解后，调节pH值至6.8～7.8，并用≤0.22μm的无菌滤膜进行除菌过滤，置于≤4℃的冰箱待用；B、往上述的DMEM溶液中加入占DMEM培养液体积1％～8％的胎牛血清后，接种细胞进行单层培养；C、待单层细胞培养好后，弃去培养容器内的DMEM培养液，并用无菌洗液洗；D、弃去无菌洗液，然后往培养容器内加入亲和剂和步骤A所述的DMEM培养液，其中亲和剂的体积用量为DMEM培养液体积用量的0.01％～1％；E、将培养容器置于细胞培养箱中静置培养1min～30min后，接种鸭黄病毒，混合均匀后置于细胞培养箱中培养2～5天，收获病毒液；其中，步骤D中所述的亲和剂由以下按质量百分数计的各组分制备而成：丙二酸  0.5～0.8％；   磷酸      0.5～1％；山梨酸  0.2～0.5％；   苹果酸    0.4～0.5％；无机盐  2.5～2.9％；   去离子水  余量。