[发明专利]一种快速检测甘蔗属SPSB基因多态性的方法及应用有效
申请号: | 201510060748.5 | 申请日: | 2015-02-05 |
公开(公告)号: | CN104561365A | 公开(公告)日: | 2015-04-29 |
发明(设计)人: | 刘洪博;范源洪;刘新龙;蔡青;陆鑫;苏火生;毛钧;马丽;林秀琴;徐超华;李旭娟 | 申请(专利权)人: | 云南省农业科学院甘蔗研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人: | 陈左 |
地址: | 661600 云南省红河*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开一种快速检测甘蔗属蔗糖磷酸合成酶B基因多态性的方法。该方法是以甘蔗大茎野生种51NG3、甘蔗品种ROC22、甘蔗属热带种Badila、甘蔗属中国种光泽竹蔗、甘蔗属印度种Nagori或甘蔗属甘蔗细茎野生种印割1号全基因组DNA为模板,设计1对引物进行PCR扩增,经琼脂糖凝胶检测,将大小为175bp片段的SPSB基因型命名为B1型,将大小为294bp片段的SPSB基因型命名为B2型,将大小为421bp片段的SPSB基因型命名为B3型。本发明为甘蔗糖分性状标记辅助选择提供了一种在DNA水平的鉴定方法,有利于甘蔗杂交后代中SPSB基因不同单倍型的跟踪,确定甘蔗糖分积累的有效SPSB基因型,对快速建立遗传优良的甘蔗种质具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 甘蔗 spsb 基因 多态性 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种快速检测甘蔗属SPSB基因多态性的方法,其特征在于,设计一对引物SPSB2177P1扩增含多态的DNA片段,经琼脂糖凝胶电泳检测,依据获得的电泳图谱条带类型判断SPSB基因多态类型,包括如下步骤:步骤(1),模板的制备:提取被测样本的基因组DNA;步骤(2),引物设计:所述的引物对SPSB2177P1为:上游引物:5’‑TACATGGTTGGTTGTGGTGCT‑3’;下游引物:5’‑GTGTCTGACTTGACGGGTGGT‑3’;步骤(3),PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测;步骤(4),基因型的判断;步骤(5),SPSB基因多态结果鉴定。
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