[发明专利]一种全细胞催化合成香草醛的方法

摘要

本发明公开一种全细胞催化合成香草醛的方法，本发明的反应体系中，通过添加离子溶剂或无机氮源，使得香草醛的产率得到大幅提升，同时通过选用高特异性的菌株CGMCC1347，其高特异性地转化异丁香酚生成香草醛，减少了副产物的生成，降低了后期分离纯化的成本。

主权项

1.一种全细胞催化合成香草醛的方法，其特征在于，包括步骤：S1、将保存的菌株CGMCC1347接入种子培养基中活化，32~40℃、100~300rpm振荡反应6~36h得到种子液；S2、反应结束后，取2ml种子液接入30~70ml发酵培养基中，32~40℃、100~300rpm振荡反应12~36h得到菌液；S3、取10ml菌液3000~6000rpm离心5~20min，弃上清，获得湿菌体；S4、往湿菌体中加入5~15ml缓冲溶液，重悬菌体并转移至装有0.1~0.5g异丁香酚的锥形瓶中，盖上橡胶塞，25~35℃、100~300rpm振荡反应48~96h；S5、反应结束后，加入5~15ml95%乙醇以终止反应，沉淀蛋白并溶解底物和产物，充分混匀后5000~8000rpm离心10min；S6、取离心后的上清液，用乙醇稀释，过滤后得到香草醛；所述步骤S4中，锥形瓶中还添加有50~150ul离子溶剂；所述离子溶剂为深度低共熔溶剂；所述深度低共熔溶剂为胆碱醋酸盐型DESs或胆碱氯盐型DESs；所述胆碱醋酸盐型DESs为ChAc/U、ChAc/A、ChAc/G或ChAc/EG；所述胆碱氯盐型DESs为ChCl/U、ChCl/A、ChCl/G或ChCl/EG。