[发明专利]一种微生物发酵高三尖杉酯碱的提取方法和应用有效
| 申请号： | 201510078301.0 | 申请日： | 2015-02-13 |
| 公开（公告）号： | CN104744485B | 公开（公告）日： | 2017-09-05 |
| 发明（设计）人： | 李武;李从发;刘四新;胡晓苹 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | C07D491/20 | 分类号： | C07D491/20;A61P35/00 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司44202 | 代理人： | 郝传鑫,熊永强 |
| 地址： | 570228 *** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种微生物发酵高三尖杉酯碱的提取方法及其应用，所述提取方法包括如下步骤(1)对微生物发酵物进行分离，得菌体和去除菌体的发酵液，将去除菌体的发酵液或菌体采用有机溶剂萃取、复溶后得粗提液；(2)所得粗提液采用大孔树脂或活性炭进行吸附、解吸附得生物碱粗提取物；(3)所得生物碱粗提取物经高效液相纯化获得高三尖杉酯碱(或先经硅胶柱层析纯化得高三尖杉酯碱粗品；高三尖杉酯碱粗品再经高效液相纯化获得高三尖杉酯碱)。本发明以微生物发酵物为原料，成本低；工艺简单，可以从微生物菌体或微生物发酵液中高效率、高产率地提纯获得高三尖杉酯碱。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 微生物 发酵 高三尖杉酯碱 提取 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种微生物发酵高三尖杉酯碱的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)对微生物发酵物进行分离，得菌体和去除菌体的发酵液，将去除菌体的发酵液浓缩，调pH值为7.0‑8.0，有机溶剂萃取得有机相并蒸干，采用原发酵液1/100‑1/1000体积的复溶缓冲溶液溶解所得固体，得粗提液；其中，所述复溶缓冲溶液的pH为7.0‑10.0；(2)将步骤(1)所得粗提液采用大孔树脂进行吸附、解吸附得生物碱粗提取物，所述大孔树脂为NKA‑9、HPD850、HPD450或D3520；所述大孔树脂的用量按如下比例添加：1g大孔树脂/5‑50mL粗提液；所述的采用大孔树脂进行吸附的时间为0.5‑2小时；所述解吸附所用缓冲液为pH为3.0‑6.0的酸性解吸附缓冲溶液；(3)步骤(2)所得生物碱粗提取物经高效液相纯化获得高三尖杉酯碱；或步骤(2)所得生物碱粗提取物先经硅胶柱层析纯化得高三尖杉酯碱粗品；高三尖杉酯碱粗品再经高效液相纯化获得高三尖杉酯碱。
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