[发明专利]一种高灵敏度菊花B病毒的检测引物、方法及应用在审
| 申请号： | 201510100532.7 | 申请日： | 2015-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN104673938A | 公开（公告）日： | 2015-06-03 |
| 发明（设计）人： | 管志勇;吴丹;宋爱萍;蒋甲福;陈发棣;王海滨;张飞;陈素梅;房伟民;赵爽 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/94 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学病毒检测领域，提供一种高灵敏度检测菊花B病毒的引物、利用该特异引物检测菊花B病毒的方法及引物的应用。其中，本方法步骤如下：1)设计针对菊花B病毒的两轮特异性引物；2)以CVB1-R为引物，对待检测菊花DNA进行反转录得到cDNA，并以步骤1)所述两轮特异性引物进行巢式PCR扩增；3)将步骤2)进行的第二轮PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，当获得381bp特异性片段时，表示待检测菊花感染菊花B病毒。本发明由于加入了特异的反转录引物进行巢式PCR，极大地提高了菊花B病毒检测灵敏度，经过验证灵敏度达到10-9ug/ul。本发明提供的方法，菊花CVB检测特异性强，工序简单，成本低廉。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 灵敏度 菊花 病毒 检测 引物 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种高灵敏度菊花B病毒的检测引物，其特征在于：该引物为CVB1‑F，CVB1‑R；CVB2‑F，CVB2‑R；其中，CVB1‑F序列为：AGTCACAATGCCTCCCAAAC，CVB1‑R序列为：CATACCTTTCTTAGAGTGCTATGCT；CVB2‑F序列为：TCTGAAGGTGAGCCAAGCG，CVB2‑R序列为：CATATCCTCGGAAGTAGCCATG。
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