[发明专利]一种美洲大蠊抗肿瘤活性提取物CⅡ-3的分子量检测方法无效

专利信息
申请号: 201510123412.9 申请日: 2015-03-20
公开(公告)号: CN104730164A 公开(公告)日: 2015-06-24
发明(设计)人: 肖培云;杨永寿;那凯歌;刘光明;杨敏 申请(专利权)人: 大理学院
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06
代理公司: 代理人:
地址: 671003 云南省大*** 国省代码: 云南;53
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摘要: 发明提供了美洲大蠊抗肿瘤活性提取物CⅡ-3的分子量检测方法。采用高效空间排阻色谱法(HPSEC)对样品的分子量及其分布进行测定,以Superdex Peptide 10/300GL或TSK G2000PWXL为色谱柱;以水(含0.1%TFA)-乙腈(0-50:100-50V/V)、磷酸盐缓冲液(pH=5~8)、Tris-HCl缓冲液(pH=7~9)中的一种为流动相,流速0.5~0.7ml/min;检测波长为200nm~400nm;进样量为5-50μl;柱温为20℃~30℃。根据标准物质的线性回归方程可计算样品的分子量。本发明为研发以美洲大蠊为原料药材的新型抗肿瘤药物的安全性提供参考。
搜索关键词: 一种 美洲 大蠊抗 肿瘤 活性 提取物 分子量 检测 方法
【主权项】:
一种美洲大蠊抗肿瘤活性提取物CⅡ‑3的分子量检测方法,其特征在于该方法包括下列步骤:(1)色谱条件与系统:以Superdex Peptide 10/300GL或TSK G2000PWXL为色谱柱,以水(含0.1%TFA)‑乙腈(0‑50:100‑50V/V)、磷酸盐缓冲液(pH=5~8)、Tris‑HCl缓冲液(pH=7~9)中的一种为流动相,流速0.5~0.7ml/min,检测波长为200nm~400nm,进样量为5‑50μl,柱温为20℃~30℃;(2)标准物质溶液的配制:称取细胞色素C、VB12、氧化型谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽、肌苷及酪氨酸适量,加水制成每1ml中各含0.1mg~2mg的溶液,分别过0.22μm滤膜,作为对照品溶液;(3)标准曲线的绘制:分别吸取上述标准物质溶液进行色谱分析,以标准物质出峰的保留时间Rt(min)为横坐标,其分子量的对数Log(Mr)为纵坐标,绘制标准曲线方程;(4)供试品溶液的制备:称取美洲大蠊抗肿瘤活性提取物CⅡ‑3干粉20mg于10ml量瓶中,加水,摇匀,定容至刻度,用0.22μm滤膜过滤,即得;(5)测定方法:吸取上述供试品溶液进行色谱分析,将样品出峰的保留时间代入标准曲线方程,可求得各峰的相对分子质量,通过面积归一化法可计算出不同分子量范围的相对百分比。
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