[发明专利]一种川百合组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种川百合组培快繁方法，百合作为“球根花卉之王”，是世界重要的商品花卉。在中国传统文化中,百合被视为“百年好合、幸福祥和”的象征,是国人最受欢迎的花卉之一。川百合（Lilium davidii）是原产于我国的特有野生种,其园艺观赏价值和药用价值都非常高。本发明以川百合鳞茎为外植体，通过不定芽诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程成功获得了川百合离体再植株，建立川百合组织培养快速繁殖技术体系，不但可以保护这些珍贵的野生花卉资源,而且也为后期的育种工作特别是百合属植物的矮化及抗性育种提供基础材料。

主权项

一种川百合组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：（1）外植体消毒：选取健康、无病害川百合鳞莲,将鳞片剥下大致分为外层麟片、中层鳞片和内层鳞片,分别用水洗去外部泥土,洗衣粉浸泡10～30min，然后置于自来水下冲洗30～60min，晾干,最后转入超净工作台上以70%～80%乙醇溶液浸泡20s～60s，无菌水冲洗4～6次，再用0.1%～0.2%升汞溶液消毒5～15min，然后用无菌水冲洗外植体至无泡沫为止，消毒期间注意振荡摇晃,使鳞片与消毒液、无菌水充分接触,最后将灭好菌的鳞片置于无菌的滤纸上吸干表面水分备用；    （2）不定芽诱导：将已经灭菌的鳞片切成1.0cm×l.Ocm左右的小块,小块四周均有切口，以鳞片的近轴面朝上的方式接种到诱导培养基进行不定芽诱导培养，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养15天后统计污染率，45天后统率诱导率；增殖培养：将诱导所得到的不定芽切分成单芽接种到增殖培养基上进行继代培养，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养40天后统计增殖情况；（4）生根培养：从基部切取步骤（3）增殖培养中获的小鳞茎并接种至生根培养基中进行诱导生根，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养30天后统计生根情况；（5）炼苗移栽：挑选生长良好且根系较为发达的组培苗,进行炼苗，首先,将所选组培苗的瓶盖揭开,在组培室里炼苗1～3天,炼苗过程中,注意喷水保持湿度，然后将这些组培苗搬至炼苗室,炼苗2～5天，之后将小苗取出,洗净培养基,注意防止根系损伤,栽植到由园土:泥炭土:腐殖质＝2:1:1混合成的基质中，移栽30天后统计成活率。