[发明专利]一种捕获内皮祖细胞EPCs的新型抗凝血支架涂层的制备方法

摘要

本发明公开了一种捕获内皮祖细胞EPCs的新型抗凝血支架涂层的制备方法，其主要步骤是先对材料表面进行羟基化处理，然后在Tris‑base(pH8.5,2mg/ml)溶液中溶解多巴胺，然后在材料表面37℃沉积一层或者多层多巴胺膜，然后根据pH和EDC/NHS浓度调节反应条件，最后在37℃条件下共价接枝CD133+(0.8～3.2ug/ml)和Fucoidan(50‑400ug/ml)的混合生物获得目标产物。本发明具有操作简单，反应条件温和，效率高，成本低优点。其目标物涂层由于低分子量岩藻聚糖的作用，具有较强的抗血栓，抗凝血和抑制平滑肌内膜增生的作用，能够快速地捕获外周血的内皮祖细胞，从而诱导其分化成内皮细胞，形成完整的内皮细胞层，具有优异抗凝血性能和生物相容性。

主权项

一种捕获内皮祖细胞EPCs的抗凝血支架涂层的制备方法，由如下步骤获得：a)将需要的钛合金基底支架依次用SDS，乙醇，去离子水超声清洗三次，每次10min，然后在烘箱中干燥；b)基底钛合金支架羟基化处理：将a)处理完成的钛合金基底支架放入浓硫酸与双氧水按照体积比7:3配比配制的溶液中在100℃浸泡1h，激活钛合金基底支架表面的羟基；然后用去离子水清洗3次，每次5min；c)将b)步所得羟基化钛合金基底支架放到多巴胺溶液中，所述多巴胺溶液为dopamin溶解到以10mM,pH8.5Tris‑base中制得；每次浸泡8h，每次浸泡完后用去离子水超声清洗3次，每次5min，连续3次，获得表面沉积多巴胺薄膜的基底支架，密封保存；d)将配好一定浓度的CD133溶液和Fucoidan溶液各50μl滴加到支架基底材料表面；在37℃的孵箱中反应4h，然后用RO水，轻轻地清洗3次，然后用 N2干燥，得到目标产物；CD133与fucoidan反应的捕获涂层可以高效捕获外周血中来自骨髓的CD133，从而加快血管修复。