[发明专利]一种蝴蝶兰的组培方法

摘要

本发明公开了一种蝴蝶兰的组培方法，包括蝴蝶兰茎尖获取、蝴蝶兰茎尖获取灭菌消毒以及对灭菌消毒后的蝴蝶兰茎尖进行初代培养、继代培养和生根培养的步骤，本发明的有益效果：(1)通过本发明的蝴蝶兰组培苗植株，生根率最高达到26.7％。(2)采用茎尖进行离体培养产生的组培苗能够保持原品种的优良性状，为良种繁育和产业化生产奠定了基础。(3)本发明的蝴蝶兰组织培养方法，操作简单、成本低廉，适于多数观赏蝴蝶兰的快速繁殖。

主权项

一种蝴蝶兰的组培方法，包括蝴蝶兰茎尖获取、蝴蝶兰茎尖灭菌消毒以及对灭菌消毒后的蝴蝶兰茎尖进行初代培养、继代培养和生根培养的步骤，其特征在于：(1) 蝴蝶兰茎尖获取：秋季剪取蝴蝶兰新萌发的小芽，经纯净水流动冲洗 30min 后放于超净工作台上；(2) 蝴蝶兰茎尖灭菌消毒：用70％～75％的酒精浸泡30～60秒，然后用经过水稀释的1∶3的84消毒液浸泡12～15分钟，并吸干表面水分；(3) 蝴蝶兰茎尖的初代培养：1)将继代培养得到组培苗在 3～6℃冷藏8～10天，转接到含IBA的生根培养基上培养15～20天；2) 将组培苗转接到WPM+2％AC 培养基上继续培养20～30天，生根后进行炼苗；3) 将生根苗移栽到水苔藓混合营养液基质中；(4) 蝴蝶兰的初代培养：取小芽基部，切成 lcm 长的小段，接种于 pH值为 5.8‑6.2 的小芽诱导培养基上；所述的初代培养的培养基为1/2MS+0.1mg/L～1mg/L GA3+1mg/L 6‑BA+0.1mg/L～0.5mg/L NAA +MN+2.0 mg/L 6‑BA+0.5 mg/L 2,4‑D；所述的继代培养的培养基为1/2MS+0.5mg/L～1mg/L6‑BA、1/2MS+0.1mg/L～0.2mg/L TDZ、蔗糖 30g/L、琼脂6g/L， (5) 蝴蝶兰的继代培养：先进行暗处理5周，再给予每日光照24h，增殖培养的培养温度为24‑26℃，光照为 30‑40μmo1/m2s；(6) 蝴蝶兰的生根培养培养：当根长2‑4cm 时，进行驯化移栽，将培养瓶移至大棚内炼苗 7‑10 天，洗去培养基，根部浸泡2‑9％酒精溶液进行消毒，移栽入穴盘中，覆盖薄膜，同时遮荫75％，2周后除去薄膜，给予全光照，进行肥水管理。