[发明专利]一种抗氧化的多糖-多肽纳米颗粒的制备方法

摘要

本发明涉及一种新型的、具有抗氧化活性的多糖-多肽纳米颗粒的制备方法。这种纳米颗粒能够应用于医药、食品工业中，作为药物和食品功能因子的口服输送载体。本发明应用碳二亚胺和羟基苯并三氮唑介导将没食子酸接枝到壳聚糖分子链上。通过没食子酸接枝壳聚糖与酪蛋白磷酸肽分子间自组装，制备新型的纳米颗粒。分别应用二苯基苦肼基(DPPH)自由基法和β-胡萝卜素-亚油酸法研究发现该新型的纳米颗粒具有较强的抗氧化活性。本发明的工艺方法具有反应条件温和、成本低、对环境友好等优点。制备的高分子纳米颗粒自身具有抗氧化活性，因此，具有广阔的应用前景。

主权项

一种抗氧化的多糖‑多肽纳米颗粒的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：(1)、将壳聚糖(0.303g，1.85mmol)和羟基苯并三氮唑(0.282g，1.85mmol)共溶于30mL去离子水中，搅拌过夜，直至溶液澄清透明；(2)、将没食子酸(0.311g，1.85mmol)逐滴加入壳聚糖溶液中，然后逐滴加入2mL的1‑乙基‑3‑(3’‑二甲基氨基丙基亚胺)盐酸盐(EDC HCl)的乙醇溶液(0.355g，1.85mmol)；(3)、调节壳聚糖中氨基葡萄糖单元与没食子酸的比例(1∶0.1，1∶1，1∶3和1∶5)，以合成具有不同没食子酸接枝率的没食子酸接枝壳聚糖共聚物；(4)、将壳聚糖与没食子酸的混合物在室温(25℃)、避光条件下反应24小时；(5)、反应结束后，将反应的混合物倒入透析袋(MWCO 3,500 Da)中，透析6天，每天换四次水；(6)、透析结束后，将合成的没食子酸接枝壳聚糖共聚物进行冷冻干燥，得到干燥的样品；(7)、将步骤(6)中制备的没食子酸接枝壳聚糖共聚物溶于1％的醋酸溶液，直至完全溶解，调节pH到6.2；(8)、将酪蛋白磷酸肽溶于去离子水中，调节溶液pH为6.2；(9)、搅拌条件下，将步骤(7)中的没食子酸接枝壳聚糖共聚物溶液逐滴加入步骤(8)中的酪蛋白磷酸肽溶液中，直至壳聚糖与酪蛋白磷酸肽质量比为1∶1，溶液呈现乳光，制备纳米颗粒。(10)、分别应用DPPH自由基和亚油酸自由基法测定制备的没食子酸接枝壳聚糖‑酪蛋白磷酸肽纳米颗粒的抗氧化活性。