[发明专利]全细胞催化制备蔗糖酯的方法

摘要

本发明公开了全细胞催化制备蔗糖酯的方法。该方法为：在蒸馏水中加入酵母浸膏、硫酸铵、磷酸氢二钾、结晶硫酸镁和诱导剂为培养基诱导培养施氏假单胞菌，培养后离心分离，并冷冻干燥制成全细胞催化剂；在反应器中配成叔戊醇/二甲基亚砜双溶剂反应介质，加入蔗糖、全细胞催化剂和甲基丙烯酸乙烯酯，常压下反应后，合成了蔗糖酯；所得产物利用薄层层析色谱法分离出高纯度的蔗糖酯。本发明用全细胞催化法合成蔗糖酯，克服了现有技术中化学合成法步骤繁琐、反应效率低、污染环境、选择性低等缺点；也克服了没法合成中所面临的酶的提取这一繁琐步骤，具有反应条件温和、环境友好、反应过程简单可控、产物纯度高、产物易从反应混合体系中分离的优点。

主权项

全细胞催化制备蔗糖酯的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）在蒸馏水中加入2~20g/L的酵母浸膏，2~20g/L的硫酸铵，0.5~5g/L的磷酸氢二钾，0.1~1g/L的结晶硫酸镁以及2~20g/L的诱导剂为培养基诱导培养施氏假单胞菌，培养48~72 h后离心分离收集，并冷冻干燥制成全细胞催化剂；（2）在反应器中按叔戊醇与二甲基亚砜的体积比为2:1～10:1的比例配成叔戊醇/二甲基亚砜双溶剂反应介质，按蔗糖的用量为5～60 mg/ml加入蔗糖，按生物催化剂与蔗糖的重量比为0.5:1～10:1的比例加入全细胞催化剂，按酰基供体与蔗糖的摩尔比为1:1～50:1加入甲基丙烯酸乙烯酯，在温度为30～60 ℃、振荡速度为150～250 rpm、常压下反应24～72 h后，合成了蔗糖酯；（3）利用薄层色谱对产物进行分析和分离，以不加催化剂的反应体系做空白对照对比，用氯仿:甲醇:水为4:1:1~8:1:1作为展开剂，洗脱之后的硅胶板喷洒10%的硫酸乙醇溶液，然后在105 ℃烘箱中烘烤5 min显色，确定糖与糖脂的分离情况。