[发明专利]一种重组单纯疱疹病毒的肝素亲和层析方法在审
| 申请号： | 201510183384.X | 申请日： | 2015-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN104845945A | 公开（公告）日： | 2015-08-19 |
| 发明（设计）人： | 刘为勇;王涛 | 申请（专利权）人： | 湖北创瑞生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/02 | 分类号： | C12N7/02;C12R1/93 |
| 代理公司： | 荆门市首创专利事务所 42107 | 代理人： | 裴作平 |
| 地址： | 448124 湖北省荆门*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 一种重组单纯疱疹病毒的肝素亲和层析方法其步骤为：病毒上清滤除细胞碎片，使用聚醚砜膜盘式过滤器进行浓缩；浓缩液冻存于-80度冰箱；HR 5/5柱子填装肝素，再将浓缩后的样品解冻装入柱子中；洗脱。收集三个峰值洗脱液，冻存于-80度或液氮中。优点：采用肝素亲和层析就是利用它具有大量带负电荷的硫酸基团的分子特性，作为蛋白及病毒纯化中的亲和配体，选择性地结合病毒表面蛋白分子及其它分子，然后利用不同浓度的盐离子做梯度洗脱，以达到将病毒单独洗脱下来的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 单纯 疱疹病毒 肝素 亲和 层析 方法 | ||
【主权项】：
一种重组单纯疱疹病毒的肝素亲和层析方法，其特征在该方法包括如下步骤：(I). 病毒上清在双羟色胺Tuffryn R聚砜胶囊过滤设备中滤除细胞碎片；(II). 使用2L的聚醚砜膜盘式搅拌细胞超滤装置进行过滤浓缩，用肝素亲和吸附缓冲液进行富集截留，浓缩液冻存于‑80度冰箱；(III). HR 5/5 层析柱填装肝素，再将浓缩后的样品解冻装入层析柱中；(IV). pH 7.5、浓度为33mM的 NaCl在153cm/h下线性流速洗脱；(V). 收集三个峰值洗脱液，冻存于‑80度或液氮中。
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