[发明专利]一种利用牡蛎体腔液中淋巴细胞检测牡蛎倍性的方法有效
| 申请号： | 201510194867.X | 申请日： | 2015-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN104818327B | 公开（公告）日： | 2018-03-16 |
| 发明（设计）人： | 李军;张扬;张跃环;喻子牛 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/04 | 分类号： | C12Q1/04 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510301 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用牡蛎体腔液中淋巴细胞检测牡蛎倍性的方法。它是以牡蛎样品体腔液中淋巴细胞作为检测材料，检测其DNA含量，然后再判定牡蛎样品的倍性组成。本发明不同于以往牡蛎倍性测定操作，此前的检测，均需采用鳃、外套膜、闭壳肌等组织作为样品，不仅仅需要制备单细胞悬液，而且还要将样本杀死，导致样品本身的后续工作很难开展。本发明结合牡蛎具有开管式循环，体腔液中含有大量淋巴细胞的特性，仅仅采用体腔液中的单细胞淋巴作为检测样品，不仅仅省略单细胞悬液制备步骤，而且检测准确率为100％，并可以保证牡蛎样品本身100％存活，不受到任何伤害，这为牡蛎倍性活体检测奠定了理论与实践应用基础。本发明具有快速、简便、实用性强等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 牡蛎 体腔 淋巴细胞 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种利用牡蛎体腔液中淋巴细胞检测牡蛎倍性的方法，其特征在于，具体步骤为：a、淋巴液抽取：将牡蛎样品放置于海水中，当其自然张开双壳时，利用注射器插入体腔中，取体腔液；b、离心重悬：将体腔液在转速为800‑1200r/min条件下离心后去除上清液，加入海水悬浮，采用孔径为50‑100μm的滤网过滤，得淋巴细胞；c、细胞核染色：将淋巴细胞用DAPI染液染色；d、染色后的样品混合均匀后检测其DNA含量，确定牡蛎样品的倍性组成。
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