[发明专利]稳定高表达OS‑9的细胞株的构建方法和应用有效
| 申请号： | 201510205030.0 | 申请日： | 2015-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN104830778B | 公开（公告）日： | 2018-01-02 |
| 发明（设计）人： | 孙力华;杨桦;肖卫东;王文生 | 申请（专利权）人： | 孙力华 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人： | 栾波 |
| 地址： | 400020 重庆市江*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种稳定高表达OS‑9的细胞株的构建方法，属于分子生物技术领域。该方法包括将plenti6.3载体和OS‑9基因连接，并转化感受态大肠杆菌；将转后的大肠杆菌进行质粒提取，获得plenti6.3‑OS‑9质粒；以所述plenti6.3‑OS‑9质粒转染293T细胞，收获病毒液，并以所述病毒液感染Caco‑2细胞后筛选出阳性克隆，培养10‑15天后，获得稳定高表达OS‑9的细胞株。该细胞株，方便了在研究OS‑9过表达的状态下，其他功能性蛋白的表达情况，为OS‑9过表达与其他功能性蛋白表达关系的研究提供了材料。可通过western blot、免疫荧光等操作进行相关蛋白的定量和定性。 | ||
| 搜索关键词： | 稳定 表达 os 细胞株 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
稳定高表达OS‑9的细胞株在制备降低对肠粘膜通透性破坏或提高肠上皮细胞中的紧密连接蛋白表达量的药物中的应用，其特征在于，所述稳定高表达OS‑9的细胞株的构建方法包括：将plenti6.3载体和OS‑9基因连接，并转化感受态大肠杆菌；将转后的大肠杆菌进行质粒提取，获得plenti6.3‑OS‑9质粒；以所述plenti6.3‑OS‑9质粒转染293T细胞，收获病毒液，并以所述病毒液感染Caco‑2细胞后筛选出阳性克隆，培养10‑15天后，获得稳定高表达OS‑9的细胞株。
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