[发明专利]一种海藻糖合酶突变体及其制备与应用有效
申请号: | 201510208489.6 | 申请日: | 2015-04-28 |
公开(公告)号: | CN104877983B | 公开(公告)日: | 2018-02-23 |
发明(设计)人: | 吴敬;宿玲恰;张悦 | 申请(专利权)人: | 湖南汇升生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/90 | 分类号: | C12N9/90;C12N15/61;C12P19/12;C12N1/15;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211 | 代理人: | 耿晓岳 |
地址: | 421800 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了一种海藻糖合酶突变体及其制备与应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明将Thermobifida fusca YX的海藻糖合酶的海藻糖合酶活性中心附近第271位的Gln密码子变成Met密码子,第220位的Ile密码子变成Val密码子,第228位Val密码子变成Ile密码子,第290位Cys密码子变成Val密码子,第294位Phe密码子变成Tyr密码子,第332位Ile密码子变成Phe密码子,分别得到突变体Q271M、I220V、V228I、C290V、F294Y、I332F。并在I220V基础上进行双突变得到突变体I220V/Q271M、I220V/V228I、I220V/C290V、I220V/F294Y、I220V/I332F。突变体实现了海藻糖合酶制备海藻糖转化率的提高,具有较高的工业价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 海藻 糖合酶 突变体 及其 制备 应用 | ||
【主权项】:
一种海藻糖合酶突变体,其特征在于,相对于海藻糖合酶亲本,所述突变体是将第220位的异亮氨酸突变成缬氨酸;或将第220位的异亮氨酸突变成缬氨酸的同时将第228位的缬氨酸突变成异亮氨酸,或将第220位的异亮氨酸突变成缬氨酸的同时将第290位的半胱氨酸突变成缬氨酸,或将第220位的异亮氨酸突变成缬氨酸的同时将第294位的苯丙氨酸突变成络氨酸,或将第220位的异亮氨酸突变成缬氨酸的同时将第332位的异亮氨酸突变成苯丙氨酸,或将第220位的异亮氨酸突变成缬氨酸的同时将第271位的谷氨酰胺突变成甲硫氨酸;海藻糖合酶亲本的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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