[发明专利]促进小鼠骨髓造血干细胞体外克隆形成及分化能力的方法在审
| 申请号： | 201510208722.0 | 申请日： | 2015-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN104789529A | 公开（公告）日： | 2015-07-22 |
| 发明（设计）人： | 张龙;张彩;陈帅;王丽娜;张建华 | 申请（专利权）人： | 济南劲牛生物科技有限公司;山东大学 |
| 主分类号： | C12N5/0789 | 分类号： | C12N5/0789;C12N5/0783 |
| 代理公司： | 济南鲁科专利代理有限公司 37214 | 代理人： | 曹玉琳 |
| 地址： | 250101 山东省济*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明为促进小鼠骨髓造血干细胞体外克隆形成及分化能力的方法，在HSC细胞体外克隆形成及诱导定向分化实验中，血清质量是影响HSC扩增及生长状态的重要因素，本研究将原代细胞培养专用血清用于小鼠HSC克隆形成及定向分化实验，并与国内外四种胎牛血清进行了对比。采用免疫磁珠分离骨髓Lin-细胞，并进行集落形成实验，培养至14天，本血清可见疏松型集落形成，其他血清无集落形成。流式分析骨髓Lin-细胞向T细胞分化结果显示，其他血清培养至7天时，细胞死亡及凋亡严重，流式分析无法观察到细胞从DN2向DN4转化过程，而本血清培养至13天和20天时，骨髓Lin-细胞由DN2/DN3阶段逐渐向DN3/DN4阶段转化，动态显示HSC由造血前体细胞逐渐向T淋巴细胞转化的过程，本研究结果与国外相关文献报道一致，表明本血清具有促进HSC扩增及定向分化的生物学效应。 | ||
| 搜索关键词： | 促进 小鼠 骨髓 造血 干细胞 体外 克隆 形成 分化 能力 方法 | ||
【主权项】：
原代细胞培养专用血清在诱导小鼠骨髓造血干细胞(HSC)定向分化为T细胞中的应用，其特征在于：所述原代细胞培养专用血清是通过以下方法制备得到的：将胎牛脐带血室温静置12h后分离收集血清，将每头份血清依次进行内毒素、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原、抗体检测，将检测结果均为阴性的血清混合，0.1μm微孔滤膜过滤除菌并分装，‑20℃保存即可。
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