[发明专利]一种虫草素发酵固体培养基及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种虫草素发酵固体培养基及其制备方法和应用，该培养基由如下步骤制备得到1)将葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硫酸镁、吐温80，溶剂为水，充分搅拌溶解后调节溶液pH值5.5～6.0，制得发酵培养液；2)将步骤1)中的发酵培养液与膨胀珍珠岩混合均匀，经喷雾干燥后装入发酵罐，121℃蒸汽灭菌20min，获得虫草素发酵固体培养基。本方法所提供的子实体量大，同步性佳，活力强，并通过喷淋补加虫草素前体腺嘌呤和三油酸甘油酯促进蛹虫草的生长与虫草素的积累，能够提高虫草素的产量和质量。

主权项

一种虫草素发酵固体培养基在发酵生产虫草素中的应用，其特征在于，将在PDA斜面培养基上长好的蛹虫草菌种用5ml无菌生理盐水洗下，制成菌悬液，接种至灭菌好的装有50ml的发酵培养液摇瓶中，于27℃，180rpm恒温摇床培养4天，加入无菌水450ml，混合均匀后，再以1wt％接种至灭菌好的虫草素发酵固体培养基中，充分搅拌使菌种均匀分布于虫草素发酵固体培养基中，每24h时以1wt％比例补水维持相对湿度，并搅拌翻料，同时从发酵罐底部通入相对湿度为80％的无菌空气，通气比为0.5min‑1，27℃培养4天后，通气比降为0.5h‑1，每5天以5wt％喷淋加入含有0.5g/L腺嘌呤和2～6g/L三油酸甘油酯的培养液使其产生大量的子实体，其余条件不变，再培养21天后发酵结束；加入1.5倍固料体积的水，80℃搅拌翻料2h，过滤收集滤液；水煮过程进行三次，合并滤液，浓缩至固料体积，得到虫草素提取液；其中，所述的虫草素发酵固体培养基的制备方法，包括如下步骤：1)将葡萄糖40～50g/L，酵母膏3～10g/L，蛋白胨5～15g/L，磷酸二氢钾0.2～1.0g/L，磷酸氢二钾0.2～1.0g/L，硫酸镁0.2～1.0g/L，吐温80 0.5～5.0g/L，溶剂为水，充分搅拌溶解后调节溶液pH值5.5～6.0，制得发酵培养液；2)将步骤1)中的发酵培养液与膨胀珍珠岩混合均匀，经喷雾干燥后装入发酵罐，121℃蒸汽灭菌20min，获得虫草素发酵固体培养基。