[发明专利]一种利用赤藓糖醇废弃菌泥生产赤藓糖醇的方法

摘要

本发明公开了一种利用赤藓糖醇废弃菌泥生产赤藓糖醇的方法。该方法包括以下步骤：将经过常规斜面活化的菌种，接种至以蔗糖和/或葡萄糖及酵母粉为原料的培养基，经过一级种子培养、二级种子培养和发酵罐发酵，制得赤藓糖醇糖液和菌泥的混合物，分离后将菌泥收集，利用固定化载体对菌泥进行固定化制备固定化颗粒，将固定化颗粒加入葡萄糖及少量氮源的灭菌发酵液中进行发酵，得到赤藓糖醇糖液，赤藓糖醇糖液经脱色和离子交换纯化后，按常规方法浓缩，结晶，离心分离后制得赤藓糖醇晶体。本发明制备工艺简单，材料便宜易得，省时、转化率高等优点，且综合利用赤藓糖醇传统发酵废弃的菌体，变废为宝，提高赤藓糖醇生产效率，适合工业化生产。

主权项

一种利用赤藓糖醇生产废弃菌泥制备固定化菌体生产赤藓糖醇的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：（1）将经过常规斜面活化的赤藓糖醇菌种用接种环取1环接种至一级培养基中，在温度为25～30℃、pH为4.5～7.5、转速为100～225r/min的条件下，进行摇床培养24～36h获得一级种子液，再将一级种子液以5～10%的接种量接入二级培养基，在温度25～30℃、pH为4.5～7.5、转速为100～225r/min的条件下，进行摇床培养12～18h获得二级种子液，将二级种子液以5～10%的接种量接入至发酵培养基中，在温度为25～30℃、pH为4.5～7.5、溶氧量为10～80%、转速为100～400r/min的条件下进行发酵120～168h，制得赤藓糖醇糖液和菌泥的混合物；（2）将步骤（1）所述混合物用离心机分离，制得赤藓糖醇糖液和菌泥，将菌泥加水稀释打匀成10～20%重量体积比的菌泥悬液；（3）将步骤（2）所述菌泥悬液与1～5%重量体积比的固定化载体混合均匀，转移至固定化器皿中，滴入重量体积比为2‑5%的氯化钙固定3～4h，其中菌泥∶固定化载体∶氯化钙的重量比为10～20∶2～5∶1～2，以常规方法制备得到固定化细胞颗粒；（4）上步骤（3）所述固定化细胞颗粒按10～20%的重量比，加入含有10～50%重量体积比的葡萄糖和0.5～2%重量体积比的氮源的灭菌发酵液中，其中葡萄糖和氮源的重量比为5～100∶1，在温度为25～32℃和pH＝4.5～7.5的条件下进行发酵，以发酵液中葡萄糖的残留小于0.1%的重量体积比则为转化中止的控制指标，得到赤藓糖醇糖液；（5）将得到的赤藓糖醇糖液采用常规方法脱色和离子交换进行纯化后，经常规方法浓缩，结晶，离心分离后制得赤藓糖醇晶体。