[发明专利]一种日本乙型脑炎病毒实时荧光等温扩增检测试剂盒及其引物和探针

摘要

本发明公开了一种日本乙型脑炎病毒实时荧光等温扩增检测试剂盒及其引物和探针，该试剂盒包括以下成分100mM Tris‑HCl，100mM KCl，20mM MgCl2，20mM DTT，20％DMSO，4mM NTP，1mM dNTP，各0.125μM的Primer‑1、Primer‑2，以及0.25μM分子信标探针；1.6U/μL AMV反转录酶，8U/μL T7RNA聚合酶，0.04U/μL Rnase H，2U/μL Ribonuclease Inhibitor，0.1％的BSA。本发明通过设计并结合临床样本筛查优化选择出的特异性正向引物、反向引物和分子信标探针，同步识别乙型脑炎病毒的3个不同区域，保证了扩增的特异性；可检测出样品中所含的个位拷贝数的乙脑病毒RNA，提高了乙脑检测的敏感性。

主权项

一种日本乙型脑炎病毒NS1基因实时荧光等温扩增检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有用于实时荧光等温扩增法检测日本乙型脑炎病毒NS1基因的特异性引物对和分子信标探针，所述的特异性引物对包括正向引物Primer‑1和反向引物Primer‑2，Primer‑1的碱基序列如SEQ ID NO：1所示，Primer‑2的碱基序列如SEQ ID NO：2所示，所述的分子信标探针在其寡核苷酸DNA分子的5’端标记荧光报告基团FAM，3’端标记促灭基团DABCYL，探针的寡核苷酸DNA分子的碱基序列如SEQ ID NO：3所示。