[发明专利]特异性抗烟曲霉菌感染的鸡卵黄抗体的制备和应用

摘要

本发明涉及免疫技术领域，特别涉及一种特异性抗烟曲霉感染的鸡卵黄抗体及其应用，制作步骤如下：1.制备烟曲霉菌抗原；2.对产蛋母鸡进行免疫注射；3.采用硫酸铵盐析法制备特异性鸡卵黄抗体冻干粉。采用此种方法制备的特异性抗烟曲霉感染的鸡卵黄抗体效价高于1：10000，采用本方法制备的特异性抗烟曲霉感染的鸡卵黄抗体是一种生物制剂，对人体产生的副作用小，对人体结膜、角膜、各处粘膜、皮肤等刺激性小，外用或者口服都无不良反应，理化性质稳定可长期保存，特别适合局部应用治疗眼表、口腔、皮肤等处的烟曲霉菌感染。

主权项

一种特异性抗烟曲霉感染的鸡卵黄抗体，其特征在于，所述的鸡卵黄抗体制备过程包括以下步骤：    步骤1：制备灭活烟曲霉菌丝悬液：接种烟曲霉菌于沙氏液体培养基中培养5天，取出烟曲霉菌丝团在研磨器中进行研磨，过滤孢子，最终将菌丝浓度调至2×10⁹CFU/ml；     步骤2：动物免疫：将菌丝浓度2×10⁹ CFU/mL的菌悬液与弗氏完全佐剂按1：1混合后充分乳化后，每只鸡注射1 mL/只，3周、5周、8周后换为弗氏不完全佐剂加强免疫3次；     步骤3：采用硫酸铵盐析法制备特异性抗烟曲霉感染的鸡卵黄抗体蛋白：鸡蛋打碎去掉蛋清及蛋黄膜，将蛋黄液与超纯水1：8混匀，调pH至5.1，静置过夜；离心取上清液；后根据硫酸铵的溶解度和液体体积加入可最多析出IgY蛋白的量，静置2h；再离心去掉上清液蛋白析出，加入磷酸盐缓冲液溶解蛋白，再次加入硫酸铵静置2h；离心去掉上清液留蛋白，再次加入最少可溶解蛋白的磷酸盐缓冲液量复溶蛋白，装入透析袋透析48h；将透析完毕的液体冻成固体后放入冻干机中制作成冻干粉。