[发明专利]人胚肾细胞HEK293T电转染的方法在审
申请号: | 201510277504.2 | 申请日: | 2015-05-27 |
公开(公告)号: | CN104846016A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 周磊;李强;李一星 | 申请(专利权)人: | 广西大学 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87 |
代理公司: | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人: | 杨立华 |
地址: | 530004 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明公开了一种人胚肾细胞HEK293T电转染的方法,该法主要采用低渗透压的电转染缓冲液,对人胚肾细胞HEK293T进行一次放电,通过高压脉冲电场和低渗透压组合,使得细胞体积增大,秒冲电场更容易击穿细胞膜,增加膜穿孔数量,外源分子更容易进入细胞质中,从而提高电转效率。实际测试表明,应用本发明HEK293T细胞转染pmaxGFP(绿色荧光蛋白)细胞学实验结果转染效率达到60%左右。本发明可以缩短周期,降低成本,减少操作复杂性,为HEK293T细胞系转基因研究提供关键的技术支持。 | ||
搜索关键词: | 人胚肾 细胞 hek293t 转染 方法 | ||
【主权项】:
一种人胚肾细胞HEK293T电转染的方法,其特征在于采用低渗透压的电转染缓冲液,对人胚肾细胞HEK293T进行一次放电;所述电转染缓冲液的渗透压为90~280mOsmol/kg,一次放电的电压为130~810V,持续时间为45~75μs。
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