[发明专利]一种成品组织工程化骨的制备方法

摘要

本发明涉及一种成品组织工程化骨的制备方法，包括以下步骤：获取骨髓的单个核细胞，扩增培养，得到单细胞悬液，所述细胞悬液的浓度为2.0×10⁶～2.0×10⁷/ml；然后将多孔支架浸润到所述单细胞悬液中，使单细胞悬液充分进入到多孔支架的内部，培养，得到细胞/支架复合体：然后将细胞/支架复合体接种到灌注式生物反应器中，加入培养基静置2～4小时后，对所述细胞/支架复合体进行连续灌注培养，得到组织工程化骨；对所述组织工程化骨进行初步清洗、深低温冷冻、病毒灭活、超声清洗、真空冷冻干燥、无菌包装以及辐照灭菌后，得到成品组织工程化骨。本发明对构建的组织工程化骨进行深低温冷冻，可有效降低骨组织的免疫原性。

主权项

一种成品组织工程化骨的制备方法，包括以下步骤：(1)获取骨髓的单个核细胞，扩增培养，得到单细胞悬液，所述细胞悬液的浓度为2.0×10⁶～2.0×10⁷/ml；(2)然后将多孔支架浸润到所述单细胞悬液中，使单细胞悬液充分进入到多孔支架的内部，培养，得到细胞/支架复合体；然后将细胞/支架复合体接种到灌注式生物反应器中，加入培养基静置2～4小时后，对所述细胞/支架复合体进行连续灌注培养，得到组织工程化骨；(3)对所述组织工程化骨进行初步清洗、深低温冷冻、病毒灭活、超声清洗、真空冷冻干燥、无菌包装以及辐照灭菌后，得到成品组织工程化骨。