[发明专利]糖原磷酸化酶同工酶BB近红外荧光法检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种糖原磷酸化酶同工酶BB近红外荧光法检测试剂盒及其用途。本发明提供的一种糖原磷酸化酶同工酶BB近红外荧光法检测试剂盒，包括位于背板上的试剂条，试剂条从加样端开始依次为样品垫、标记有免疫荧光探针的玻璃纤维素膜、包被有抗糖原磷酸化酶同工酶BB抗体的硝酸纤维素膜和吸水纸。本发明所提供的检测试剂盒结合近红外荧光检测技术，可快速，准确地检测出人全血、血清或血浆中的糖原磷酸化酶同工酶BB。

主权项

一种糖原磷酸化酶同工酶BB近红外荧光法检测试剂盒，包括位于背板上的试剂条，试剂条从加样端开始依次为样品垫、标记有免疫荧光探针的玻璃纤维素膜、包被有抗糖原磷酸化酶同工酶BB单克隆抗体的硝酸纤维素膜和吸水纸，所述免疫荧光探针为抗糖原磷酸化酶同工酶BB单克隆抗体包被的近红外荧光乳胶微球颗粒；检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：1)用浓度为0.009‑0.011mol/L、PH为7.25‑7.35的磷酸盐缓冲液将荧光乳胶微粒离心清洗并将乳胶颗粒分散，在清洗好的乳胶颗粒分散液中加入抗糖原磷酸化酶同工酶BB单克隆抗体，乳胶颗粒、抗糖原磷酸化酶同工酶BB单克隆抗体、EDCA的重量比为9‑11：0.9‑1.1：0.9‑1.1；加入EDCA使抗体与颗粒偶联；再加入乙醇胺封闭乳胶颗粒上多余的基团，并加入二环已基‑18‑冠‑6，制备获得探针溶液，制备获得的探针溶液中冠醚的浓度为4‑8mg/ml；2)将含有抗糖原磷酸化酶同工酶BB单克隆抗体的浓度为0.009‑0.011mol/L、PH为7.25‑7.35的PBS缓冲溶液喷加到硝酸纤维素膜上，烘干备用，含有抗糖原磷酸化酶同工酶BB单克隆抗体的缓冲溶液中还含有二环已基‑18‑冠‑6，所述含有抗糖原磷酸化酶同工酶BB单克隆抗体的缓冲溶液中二环已基‑18‑冠‑6的浓度为4‑8mg/ml；3)将步骤1)制备获得的探针溶液浸润玻璃纤维薄膜，干燥备用；4)将步骤2)所得的硝酸纤维素膜、步骤3)所得的标记有免疫荧光探针的玻璃纤维素膜、样品垫、吸水纸及背板组装制备成糖原磷酸化酶同工酶BB近红外荧光检测试剂盒。