[发明专利]一种水稻的育种方法

摘要

本发明提供了一种水稻的育种方法，包括以下步骤a)采用CTAB法提取野生菰DNA；b)用限制性内切酶酶切步骤a)获得的野生菰DNA，获得酶切野生菰DNA；c)采用花粉管通道法将步骤b)获得的酶切野生菰DNA导入水稻，选择变异材料进行育种。本发明通过限制性内切酶酶切野生菰DNA导入水稻后，后代的变异率比完整DNA导入明显提高，稳定速度快，获得了优良的水稻新株系和新品种。实验结果表明，酶切野生菰DNA导入水稻创新的水稻新品种茎秆粗大，穗大粒多，后期灌浆速度快，克服了大穗而分蘖力弱、包颈、结实率低的缺陷；田间观察未发现严重病虫害危害，是一批极具增产潜力的资源材料。

主权项

一种水稻的育种方法，包括以下步骤：a)采用CTAB法提取野生菰DNA；b)用限制性内切酶酶切步骤a)获得的野生菰DNA，获得酶切野生菰DNA；c)采用花粉管通道法将步骤b)获得的酶切野生菰DNA导入水稻，选择变异材料进行育种；所述限制性内切酶为HindⅢ和EcoRⅠ；所述的育种方法中步骤a)具体为：a1)取野生菰幼叶，用液氮研磨，加入2倍CTAB提取缓冲液混匀后，加入1倍CTAB缓冲液，55‑65℃恒浴30min；a2)向步骤a1)获得的溶液中加入体积比为24:1的氯仿和异戊醇，混合后离心；a3)向步骤a2)获得的上清液中加入CTAB缓冲液、体积比为24:1的氯仿和异戊醇，混合后离心；a4)向步骤a3)获得的上清液中加入异丙醇，离心，得到的沉淀用高盐缓冲液溶解后离心；a5)向步骤a4)获得的上清液中加入异丙醇，离心，得到的沉淀用双蒸水溶解，加入2.5倍体积95％冷乙醇‑40℃冰箱中沉淀2h后离心；a6)将步骤a5)获得的沉淀用冷乙醇洗一次，自然干燥后，用TE缓冲液溶解，加入RNA酶贮存缓冲液处理后，获得野生菰DNA。