[发明专利]一种海南捕鸟蛛毒素III的制备方法

摘要

本发明提供一种海南捕鸟蛛毒素III的制备方法，属多肽及蛋白质制备领域，海南捕鸟蛛毒素III采用Fmoc法固相多肽合成方法合成，合成树脂为Rink amide树脂，第2位和第17位半胱氨酸采用Fmoc-Cys(Mmt)-OH，其余位置的半胱氨酸采用Fmoc-Cys(Trt)-OH，多肽链合成完毕后用3% TFA去Mmt保护，第2位和第17位半胱氨酸二硫键形成采用空气氧化法，形成第一对二硫键后多肽从树脂上裂解下来，第二对和第三对二硫键的形成采用固相DTNB氧化法，最终形成有生理活性的海南捕鸟蛛毒素III。本发明方法制备的海南捕鸟蛛毒素III生理活性和天然毒素活性一致，合成效率高。

主权项

一种海南捕鸟蛛毒素III的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：选用Rink Amide树脂，利用Fmoc氨基保护和侧链保护氨基酸为原料，按照海南捕鸟蛛毒素III的序列依次固相合成，第2位和第17位半胱氨酸采用Fmoc‑Cys(Mmt)‑OH；多肽序列合成完成后，采用1‑3% TFA选择性去Mmt保护；采用空气氧化法在树脂上第2位和第17位半胱氨酸形成二硫键；90% TFA裂解树脂获得含一对二硫键多肽，制备色谱纯化，冷冻干燥；纯化的含一对二硫键多肽采用固相DTNB氧化复性，形成第二对和第三对二硫键；制备色谱纯化，冷冻干燥获得海南捕鸟蛛毒素III纯品。