[发明专利]完整获取植物组织中核糖体新生肽链复合物的方法与应用

摘要

本发明公开一种完整获取植物组织中核糖体新生肽链复合物的方法与应用。该方法的步骤为：用水将新鲜的植物组织清洗干净，用液氮速冻处理至植物组织的温度低于‑80℃，后提取RNC；或是将液氮速冻的植物组织存储于不高于‑80℃的环境，在该条件下进行稳定的储存、运输后再提取RNC；提取RNC的步骤为：加液氮对植物组织进行研磨，得到粉末；保持在液氮环境下往粉末中加入预冷的细胞裂解液，研磨混匀；置于冰上等待融化后进行裂解反应；离心，取上清进行RNC的提取，得到RNC。该方法可方便有效地获取植物组织样品的RNC；且满足RNC样品的长期储存与运输的需要，便于分析基因功能。

主权项

1.一种完整获取植物组织中核糖体新生肽链复合物的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）用水将新鲜的植物组织清洗干净，用液氮进行冷冻处理至植物组织的温度低于‑80℃；（2）将步骤（1）冷冻处理好的植物组织存储于不高于‑80℃的环境，在该条件下，能进行稳定的储存、运输；（3）从步骤（1）冷冻处理好的植物组织或是步骤（2）进行储存、运输的植物组织中提取核糖体新生肽链复合物时，步骤如下：①在研钵内加液氮对植物组织进行研磨，得到粉末；②保持在液氮环境下往粉末中加入预冷至0～6℃的细胞裂解液，继续研磨混匀；然后置于冰上等待完全融化，进行裂解反应；细胞裂解液的组成如下：190～210 mM、pH 7.8～8.2的Tris‑HCl，45～55 mM MgCl2，390～410 mM KCl，0.05～0.15 mg/mL 放线菌酮，4～6 mM 二硫苏糖醇，体积百分比0.5～1.5 %的Triton X‑100；③离心，取上清进行核糖体新生肽链复合物的提取，得到植物组织中的核糖体新生肽链复合物。