[发明专利]EV713C蛋白酶作用靶点检测试剂盒及检测方法有效
| 申请号： | 201510342092.6 | 申请日： | 2015-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN105067574B | 公开（公告）日： | 2017-11-14 |
| 发明（设计）人： | 李冰清;孟红;秦立增;李鹏;李志会;岳盈盈;宋楠楠 | 申请（专利权）人： | 山东省医学科学院基础医学研究所;山东中医药大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 济南鲁科专利代理有限公司37214 | 代理人： | 曹玉琳 |
| 地址： | 250062 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种EV71 3C蛋白酶作用靶点检测试剂盒，包括3C蛋白、多肽底物，以及酶解反应缓冲液，所述3C蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示；所述多肽底物为Dabcyl‑EALFQGPPKFE‑Edans。本发明还公开了一种EV71 3C蛋白酶作用靶点检测方法将待检测化合物、3C蛋白加入到酶解反应缓冲液中，然后加入多肽底物，混匀，在336nm波长激发下，检测其在490nm处的荧光强度；若检测不到荧光，则表明该待检测化合物能抑制3C蛋白；若能够检测到荧光，则表明该待检测化合物不能抑制3C蛋白。本发明的检测试剂盒及方法，可有效对待检测化合物的抗EV71能力进行检测，方法简便，易行，特异性及灵敏性高。 | ||
| 搜索关键词： | ev71 蛋白酶 作用 检测 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
一种EV71 3C蛋白酶作用靶点检测试剂盒，其特征在于：包括3C蛋白、多肽底物，以及酶解反应缓冲液，所述3C蛋白的序列如下，如SEQ ID NO.1所示：GPSLDFALSLLRRNIRQVQTDQGHFTMLGVRDRLAVLPRHSQPGKTIWVEHKLVNVLDAVELVDEQGVNLELTLITLDTNEKFRDITKFIPENISTASDATLVINTEHMPSMFVPVGDVVQYGFLNLSGKPTHRTMMYNFPTKAGQCGGVVTSVGKVVGIHIGGNGRQGFCAGLKRSYFASEQ；所述多肽底物为Dabcyl‑EALFQGPPKFE‑Edans，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，N端连接Dabcyl基团，C端连接Edans基团。
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