[发明专利]一种DNA催化循环网络诱导的DNA‑纳米金组装方法及其在单碱基突变检测中的应用

摘要

本发明涉及一种DNA催化循环网络诱导的DNA‑纳米金组装方法以及此种方法在单碱基突变检测中的应用。本发明提供的检测手段操作方便，在常温下反应即可，尤其是DNA‑纳米金复合物是非特异性的，无需重新制备，极大地降低了实验工作量的同时也方便此技术用于不同DNA目标链的检测。在实际检测中通过颜色差异以及紫外可见分光光度计就可以进行检测。

主权项

一种DNA催化循环网络诱导DNA‑纳米金组装的试剂盒，其中包括：1)DNA底物链，所述DNA底物链由连接链和保护链杂交而成，其中所述连接链从5’端到3’端依次由区域1、区域2、区域3、区域4、区域5连接而成，所述保护链从3’端到5’端依次由任选的区域a*、区域2*、区域3*、区域4*、区域6*连接而成，其中，区域2、区域3、区域4组成的连接链中间部分与区域2*、区域3*、区域4*组成的保护链中间部分完全互补，保护链除任选的区域a*和区域2*外的其它部分与目标链互补，区域6*为触发DNA链替换反应的粘性末端；2)燃料链，所述燃料链为与保护链互补的单链DNA，其中所述燃料链的两端分别含有碱基错配，所述碱基错配的位置是燃料链中区域2和区域4部分与区域3相连部分的第一个碱基，并且，其中所述燃料链两端与保护链互补的粘性末端分别增加1‑3个碱基，形成区域a和区域b；3)连接有纳米金1的DNA双链1和连接有纳米金2的DNA双链2，其中，所述DNA双链1由纳米金连接链1和纳米金保护链1杂交而成，所述DNA双链2由纳米金连接链2和纳米金保护链2杂交而成，所述纳米金连接链1从3’端到5’端依次由区域7*、区域1*、区域2*连接而成，所述纳米金保护链1由区域1组成，所述纳米金连接链2从3’端到5’端依次由区域4*、区域5*、区域8*连接而成，所述纳米金保护链2由区域5组成，其中，所述DNA双链1和所述DNA双链2分别通过区域7*或区域8*与连接有区域7或区域8的纳米金1和纳米金2相连，并且DNA双链1中的纳米金连接链1的区域1*和区域2*与步骤1)所述连接链的区域1和区域2互补，DNA双链2中的纳米金连接链2的区域4*和区域5*与步骤1)所述连接链的区域4和区域5互补；其中区域1与区域1*、区域2与区域2*、区域3与区域3*、区域4与区域4*、区域5与区域5*、区域6与区域6*、区域7与区域7*、区域8与区域8*分别完全互补。