[发明专利]丝状真菌基因组的提取方法在审
| 申请号： | 201510364596.8 | 申请日： | 2015-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN104946628A | 公开（公告）日： | 2015-09-30 |
| 发明（设计）人： | 张春晓;韩梁彦;王丽丽 | 申请（专利权）人： | 河北科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12R1/82;C12R1/685;C12R1/885;C12R1/80 |
| 代理公司： | 石家庄旭昌知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 13126 | 代理人： | 彭随丽 |
| 地址： | 050000 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种丝状真菌基因组的提取方法，使用蜗牛酶和纤维素酶的混合酶液对产黄青霉菌、黑曲霉菌、里氏木霉菌、桔青霉菌等丝状真菌菌丝进行酶解，并将酶解处理与超声处理、高温加热处理进行有效结合，从而获得供PCR鉴定用含有丝状真菌基因组的上清液。由本发明的提取方法获得的丝状真菌菌丝酶解液，其上清液直接用于PCR反应，无需进行提纯操作，便能够得到丝状真菌18S rDNA基因条带，操作过程简单、安全、稳定，避免了有毒提取试剂的使用，减少对实验人员的伤害。 | ||
| 搜索关键词： | 丝状 真菌 基因组 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种丝状真菌基因组的提取方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：a、获取丝状真菌菌丝；b、加入酶液：向丝状真菌菌丝加入蜗牛酶和纤维素酶的混合酶液，得到丝状真菌菌丝液； c、超声处理：将步骤b获得的丝状真菌菌丝液于40~70W超声5~15min；d、酶解：将步骤c处理后的丝状真菌菌丝液在25~40℃酶解10~15h，得到丝状真菌菌丝酶解液；e、将丝状真菌菌丝酶解液静置，待丝状真菌菌丝酶解液分层后，获得供PCR鉴定用含有丝状真菌基因组的上清液；在步骤a与步骤b之间或步骤d与步骤e之间，设有对丝状真菌菌丝或丝状真菌菌丝酶解液进行高温加热处理步骤，所述高温加热处理步骤中的加热温度为75~100℃，加热时间为5~15min。
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