[发明专利]微量起始DNA的高通量测序文库构建方法及其所构建的高通量测序文库有效
| 申请号： | 201510369505.X | 申请日： | 2015-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN104894651B | 公开（公告）日： | 2017-04-12 |
| 发明（设计）人： | 胡政;刘运超;王大伟;朱海浩;李明洲 | 申请（专利权）人： | 天津诺禾医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C40B40/06 | 分类号： | C40B40/06;C40B50/06;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司11240 | 代理人： | 赵囡囡,吴贵明 |
| 地址： | 301700 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种微量起始DNA的高通量测序文库构建方法及其所构建的高通量测序文库。该构建方法包括对样本DNA进行物理打断，得到片段化DNA；对片段化DNA进行末端修复及加A，得到修复DNA；利用连接增强剂对修复DNA进行接头连接，得到带接头片段；以及对带接头片段进行扩增，得到高通量测序文库；连接增强剂为DMSO、乙醇、乙二醇或甘油。通过在接头连接的步骤中添加具有连接增强作用的DMSO、乙醇、乙二醇或甘油等小分子物质，利用这些小分子物质刺激连接酶的活性中心区域来增强连接活性，提高接头连接效率，使更多修复DNA片段连上接头序列，从而提高了微量起始量样本的测序成功率。 | ||
| 搜索关键词： | 微量 起始 dna 通量 序文 构建 方法 及其 | ||
【主权项】：
一种微量起始DNA的高通量测序文库构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：步骤S1，对样本DNA进行物理打断，得到片段化DNA；步骤S2，对所述片段化DNA进行末端修复及加A，得到修复DNA；步骤S3，利用连接增强剂对所述修复DNA进行接头连接，得到带接头片段；以及步骤S4，对所述带接头片段进行扩增，得到所述高通量测序文库；其中，所述连接增强剂为DMSO、乙醇、乙二醇或甘油。
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