[发明专利]一种油橄榄叶橄榄苦苷粗提取物制备羟基酪醇的方法

摘要

本发明公开了一种油橄榄叶橄榄苦苷粗提取物制备羟基酪醇的方法，油橄榄叶橄榄苦苷粗提取物酶解工艺与酸水解、碱水解相比，方法条件较温和，整个过程减少了酸、碱催化剂的使用。从10种酶中，同时以橄榄苦苷降解率和羟基酪醇含量为指标，筛选出半纤维素酶为降解橄榄苦苷效果最好的一种酶，最优工艺条件为温度60℃、pH值5.5、酶量40mg、时间6h，得到HT含量为6.07％，OE降解率为85.28％。

主权项

一种油橄榄叶橄榄苦苷粗提取物制备羟基酪醇的方法，其特征在于包括以下步骤：a.制备方法：酸水解工艺：粗提取物与酸水解液固液比为1g∶10～100mL，加入为0.1mol/L～1mol/L HCl溶液，置于30℃～100℃的恒温水浴摇床中，水解1h～10h后，中和至中性，过滤，滤液经乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层浓缩干燥，得到羟基酪醇提取物；生物酶法工艺：以橄榄苦苷降解率和羟基酪醇含量为综合考察指标，从中温淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、木瓜酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、β‑葡聚糖酶、半纤维素酶、单宁酶、β‑葡萄糖苷酶10种酶中筛选出降解橄榄苦苷制备羟基酪醇效果最好的半纤维素酶；通过酶解单因素和正交优化确定最佳工艺条件，所述最佳工艺条件为在0.1g～5g的油橄榄叶粗提取物中，加入40mg半纤维素酶，在pH为5.5、温度为60℃时，酶解6h，制备羟基酪醇提取物；b.橄榄苦苷和羟基酪醇HPLC分析方法：称取橄榄苦苷和羟基酪醇对照品配制成混合溶液，浓度范围为0.1～10μg，选择C18色谱柱，流动相为甲醇和水比例为1∶1～10，在波长220～280nm下进样分析，以HPLC峰面积为纵坐标，橄榄苦苷和羟基酪醇质量分别为横坐标，绘制HPLC标准曲线；c.羟基酪醇提取物质量评价：称取羟基酪醇提取物溶于甲醇，通过0.45μm有机膜滤过，采用HPLC分析，制备的羟基酪醇提取物中羟基酪醇含量2～20％。