[发明专利]一种可同时鉴别TGEV和PEDV病毒的双重RT-PCR方法在审
| 申请号： | 201510411851.X | 申请日： | 2015-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN105154583A | 公开（公告）日： | 2015-12-16 |
| 发明（设计）人： | 宋磊;吕茂杰;杨保收;付旭彬;梁武 | 申请（专利权）人： | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 李明卓 |
| 地址： | 300308 天津市滨海新区空港*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种可同时鉴别TGEV和PEDV病毒的双重RT-PCR方法，该方法通过对TGEV S蛋白基因和PEDV S蛋白基因序列进行比对，分别选择其保守序列设计引物，保证病原鉴定的准确性和引物的特异性。另外，通过对RT-PCR反应体系和反应条件的优化，得到特异性、敏感性较高的PEDV和TGEV的双重RT-PCR检测方法。经最终实验证实，本发明的双重RT-PCR方法，不仅TGEV和PEDV的单项RT-PCR敏感性高，分别能达到1.51ng/μL和1.82ng/μL，TGEV和PEDV的双重RT-PCR敏感性也极其显著，最低可检测到14.50ng/μL的RNA模板量，与部分抗原快速检测卡相比本发明方法敏感性高、成本低廉，能够快速实现对PEDV和TGEV的特异性和敏感性检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 同时 鉴别 tgev pedv 病毒 双重 rt pcr 方法 | ||
【主权项】：
一种用于鉴别TGEV和PEDV的方法，该方法包括以下步骤：1）提取待测样品中病毒RNA；2）将步骤1）得到的RNA反转录为cDNA；3）将步骤2）得到的cDNA针对其中目的基因执行PCR扩增；4）对扩增产物测序，以确定其中是否含有目的基因；其特征在于：所述目的基因分为TGEV目的基因和PEDV目的基因，其中所述TGEV目的基因是TGEV的S蛋白基因，所述PEDV目的基因是PEDV的S蛋白基因。
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