[发明专利]高效液相色谱测定头孢呋辛酯片中杂质含量的方法

摘要

本发明公开了一种高效液相色谱测定头孢呋辛酯片中杂质含量的方法，它包括如下步骤：高效液相色谱仪以固定相为十八烷基键合硅胶色谱柱，流动相为0.1～0.2mol/L磷酸二氢铵溶液:甲醇=60:40～64:36。柱温为25℃～35℃，检测波长为278～280nm。分别吸取空白溶液、各杂质溶液、供试品溶液各20µl注入液相色谱仪，记录色谱图。计算杂质对照品溶液浓度的值为X与相应峰面积值为Y，进行线性拟合，得出线性回归方程，线性范围为杂质A在2.0136～7.5510µg/ml、杂质B在1.4826～5.5599µg/ml、杂质C在 0.5050～1.8936µg/ml、质D在0.5155～1.9330µg/ml、杂质E在0.4993～1.8723µg/ml范围内与其峰响应值成显著线性关系。本发明测定头孢呋辛酯原料药中杂质A、B、C、D、E，分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高。

主权项

高效液相色谱测定头孢呋辛酯片中有关物质含量的方法，其特征在于，它包括如下步骤：(1) 杂质储备液的制备：取头孢呋辛酯、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E用甲醇分别溶解并稀释成每1mL分别约含头孢呋辛酯0.250mg、杂质A 0.50mg、杂质B 0.37mg、杂质C  0.12mg、杂质D  0.12mg、杂质E  0.12mg的溶液；(2) 杂质测试溶液的制备：分别取上述各杂质储备液1ml至100ml量瓶中用流动相定容至刻度摇匀，即得；(3)供试品溶液的制备：精密称取头孢呋辛酯片细粉适量，用甲醇溶解后加流动相定容至刻度，制成每1mL约含头孢呋辛酯0.250mg 的溶液；(4)对照品溶液的制备：精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀；(5)空白溶液的制备：甲醇；(6)测定：高效液相色谱仪以固定相为十八烷基键合硅胶色谱柱，流动相为0.1～0.2mol/L磷酸二氢铵溶液:甲醇=60:40～64:36；柱温为25℃～35℃，检测波长为278～280nm分别吸取对照品溶液与供试品溶液各15～25µl，注入高效液相色谱仪，读取数据；(7)计算各杂质溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99，对照品溶液峰形对称，理论塔板数2000以上，杂质测试溶液色谱图中各杂质分离度应不小于1.5，空白溶液色谱图，无与杂质测试溶液色谱图相同的峰出现，即空白溶液无干扰；(8)每克头孢呋辛酯片中杂质A 不得大于2.0%、杂质B 不得大于1.5%、其他单个杂质不得大于1.0%。