[发明专利]脐带间充质干细胞的大量培养方法有效
申请号: | 201510423138.7 | 申请日: | 2015-07-17 |
公开(公告)号: | CN105112360A | 公开(公告)日: | 2015-12-02 |
发明(设计)人: | 曾宪卓;黄海军 | 申请(专利权)人: | 深圳爱生再生医学科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种脐带间充质干细胞的大量培养方法,包括:获取脐带沃顿胶;将脐带沃顿胶进行P0代培养至细胞融合度为40%~50%后,传P1代培养至细胞融合度为85%~95%;将P1代细胞于平板培养基进行接种培养,分离未被平板培养基粘附的悬浮细胞;将悬浮细胞于含有白血病抑制因子和成纤维样生长因子的培养基传P2代培养。本发明的上述组织贴壁培养的方法,将早期发生多向性变化较低的P0细胞直接培养至P1代后,用组织培养平板进行粘附筛选,保持细胞分化度的均一;之后用白血病抑制因子和成纤维样生长因子增加细胞在P2代培养中的贴壁性能以及抑制分化,从而得到分化度较低且趋于一致、贴壁能力较强利于收集的脐带间充质干细胞的。 | ||
搜索关键词: | 脐带 间充质 干细胞 大量 培养 方法 | ||
【主权项】:
一种脐带间充质干细胞的大量培养方法,其特征在于,包括如下步骤:获取脐带沃顿胶;将所述脐带沃顿胶进行P0代培养至细胞融合度为40%~50%;将所述P0代培养的细胞传P1代培养至细胞融合度为85%~95%,收获P1代细胞;将所述P1代细胞于平板培养基进行接种培养,分离未被平板培养基粘附的悬浮细胞;将所述悬浮细胞于含有白血病抑制因子和成纤维样生长因子的培养基传P2代培养。
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