[发明专利]一种高效分离松茸菌种的方法

摘要

本发明提供了一种高效分离松茸菌种的方法，方法是利用松茸的孢子分离，夹取松茸的组织块，组织块既包含菌褶又包含菌肉部分，粘于培养皿盖内表面正中间，菌褶部分向下，成熟后的菌褶可以喷洒大量孢子，松茸孢子落到培养基上即可萌发成纯菌丝体。利用该方法及培养基分离松茸菌种的成功率高达90％以上，且操作简单易行，所需材料少；组织块与培养基没有直接接触，避免了一些杂菌污染，大大降低了污染率；使用本发明中的培养基培养松茸孢子，萌发率高，菌丝粗壮，生长速度快，形成明显的气生菌丝。本发明可以解决目前松茸利用菌褶分离成功率不理想、易污染、菌丝在培养基上生长速度极其缓慢，难以迅速扩增等问题。

主权项

一种高效分离松茸菌种的方法，其特征在于，方法如下：挑选松茸子实体时选择外观典型、大小适中、菌肉肥厚、颜色正常且尚未开伞的子实体，将松茸子实体用质量浓度75％酒精棉擦洗2‑3次，放入已灭菌的超净工作台中；将松茸子实体沿菌盖与菌柄交界处掰开，再将菌盖表面表皮连同菌幕撕下，露出无菌的菌肉与菌褶部分；用无菌镊子夹住菌盖边缘，夹取1‑2cm³大小的组织块，夹取的组织块既包括上层的菌肉又包括下层的菌褶部分；此时平板培养基温度在60℃左右，尚未凝固，用组织块的菌肉部分蘸取少量未凝固培养基，菌褶部分不与培养基接触，将组织块粘于培养皿盖内表面正中间，菌褶部分向下，组织块与培养基距离0.6cm；盖上盖封口保存，在25℃黑暗条件下正置培养，组织块的菌肉部分向菌褶供给营养，使菌褶成熟并喷洒孢子，成熟的孢子喷洒至培养基上萌发成纯菌丝体。