[发明专利]一种维生素B12的制备方法

摘要

本发明公开了一种维生素B12的制备方法。将VB12发酵液直接加热水解，释放出细胞内的VB12，然后进行二级膜过滤、转鼓离心脱蛋白、蛋白吸附等除杂过程，再进行纳滤浓缩脱水、氰化钠转化得到氰钴胺盐,经三级树脂吸附柱除杂、结晶分离后得到纯品氰钴胺即VB12。本发明可得到占蛋白总量80%以上的无助滤剂蛋白，蛋白和菌丝体可用于深加工生产高附加值产品。本发明的方法，氰化钠用量较传统工艺降低90%以上，降低生产成本，由于大分子液中蛋白等杂质去除率高，无有毒含氰菌丝产生，省去了阳离子交换树脂柱吸附工序，减少一次性投资，生产时间缩短，提高了产能，VB12总收率达83%。

主权项

一种维生素B12的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)水解向VB12发酵液中加入与发酵液相同质量的水，加热至90～100℃进行水解，释放出细胞内的VB12，得到水解液；(2)一次膜过滤将步骤 (1)得到的水解液采用金属膜或陶瓷膜系统进行过滤，滤除蛋白、菌丝体等，当透过液滤出速度明显下降时，向膜系统中加入一定量的水继续过滤，当水解液中VB12含量低于5μg/L时，停止加水，过滤结束，收集一次膜透过液和一次膜浓缩液；(3)二次膜过滤将步骤(2)得到的一次膜透过液采用截留分子量为10000～80000的超滤膜系统进行过滤除杂，当透过液滤出速度明显下降时，向膜系统中加入一定量的水继续过滤，当水解液中VB12含量低于5μg/L时，停止加水，过滤结束，收集二次膜透过液和二次膜浓缩液；(4)预涂转鼓脱蛋白将步骤(3)得到的二次膜透过液采用立式预涂转鼓离心机脱除蛋白，预涂剂为硅藻土和珍珠岩，当蛋白积累至一定厚度被刮刀刮下，收集刮下的无助滤剂蛋白，当脱蛋白结束时，调节刮刀间距，刮下少量的有助滤剂蛋白并收集，同时收集转鼓滤液；(5)蛋白吸附将步骤(4)得到的转鼓滤液采用蛋白吸附树脂柱吸附其中的蛋白杂质，得到精制滤液，采用酸液或碱液或次氯酸钠对蛋白吸附树脂柱进行解吸，并收集蛋白；(6)纳滤浓缩将步骤(5)得到的精制滤液采用纳滤膜进行浓缩，得到大分子液和小分子液，其中，一部分小分子液送入步骤(2)一次膜过滤工序，剩余小分子液送入步骤(3)二次膜过滤工序；(7)氰化钠转化向步骤(6)得到的大分子液中加入适量氰化钠得到含氰精制滤液；(8)三级吸附柱除杂结晶将步骤(7)得到的含氰精制滤液进行三级吸附树脂柱除杂结晶，最终得到纯品氰钴胺(VB12)；(9)将步骤(2)一次膜过滤工序收集到的一次膜浓缩液和步骤(3)二次膜过滤工序收集到的二次膜浓缩液混合后进行分离，分离出的清液送入步骤(1)水解工序，浓渣无助滤剂菌丝体与步骤(4)预涂转鼓脱蛋白工序得到的无助滤剂蛋白和步骤(5)蛋白吸附工序得到的蛋白一起收集，用于深加工；(10)将步骤(4)预涂转鼓脱蛋白工序得到的无助滤剂蛋白进行焚烧处理。